应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 先用透明水解圈的方法筛选产酶好的菌，请高人指点一下刚果红染色法的具体操作啊
141/2返回列表12下一页
查看: 3235  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

容和buyer

新虫 (小有名气)

[求助] 先用透明水解圈的方法筛选产酶好的菌，请高人指点一下刚果红染色法的具体操作啊 已有3人参与

查了好多文献，都没有具体讲怎么做的。涂好一般的平板后，是要把菌体留在里面倒刚果红，还是移出菌体后倒入刚果红？
如果菌体在里面就倒入刚果红的话，那加入刚果红的要灭菌吗？不灭菌的话，会不会污染菌株啊。而且到了刚果红后还要用生理盐水洗，好难洗下来。请大神给个详细点的操作步骤，谢谢谢谢万分感谢。
而且听说初筛优势菌株（产酶）还有好多种方法，了解一点的虫虫给个普及，希望多交流。谢谢。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-10-15 18:54:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wisemoon1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
容和buyer: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-10-16 10:12:35
我是高压蒸汽灭完培养基后凉至50℃，直接加入过滤除菌的刚果红，一起倒平板，然后再接菌。省去了NaCl洗涤这一步骤，也会有透明圈产生，而且效果还不错。过滤除菌我们是加入到注射器里，套上无菌滤膜，直接推进培养基中的。如果刚果红不除菌，确实有染杂菌的风险。
赞一下(3人) 回复此楼
lovemyself
5楼2015-10-16 08:55:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

专吃虫

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以挑几个酶圈大的，对应点在平板上，标记，然后染色原始板，这样就不要灭菌了，如果确定是要的，就做下去

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-10-16 07:26:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

随堂笔迹

金虫 (小有名气)
当然是菌体留在里面直接染，灭菌是肯定的，所有的都要灭菌，无菌操作，至于步骤随便下篇文章就有了，

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-15 23:49:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定一下酶的种类。
赞一下 回复此楼
蓝精灵
4楼2015-10-16 08:10:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

容和buyer

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 专吃虫 at 2015-10-16 07:26:28
你可以挑几个酶圈大的，对应点在平板上，标记，然后染色原始板，这样就不要灭菌了，如果确定是要的，就做下去

挑酶圈大的？没挑之前是看不出酶圈大，就是得通过刚果红染色法来了解的。您这里说的对应点再平板上，是说把菌体移到另外一块平板上了吗？如果是那样，确实不用刚果红就不用灭菌了。
赞一下 回复此楼
6楼2015-10-16 10:04:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

容和buyer

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by mlanqiang at 2015-10-16 08:10:48
确定一下酶的种类。

是甘露聚糖酶。
回复此楼
7楼2015-10-16 10:05:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

容和buyer

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wisemoon1988 at 2015-10-16 08:55:31
我是高压蒸汽灭完培养基后凉至50℃，直接加入过滤除菌的刚果红，一起倒平板，然后再接菌。省去了NaCl洗涤这一步骤，也会有透明圈产生，而且效果还不错。过滤除菌我们是加入到注射器里，套上无菌滤膜，直接推进培养基 ...

非常感谢。这应该也是一种方法，可以尝试一下。能再问一下您刚果红用过滤除菌方法，具体一点是如何的。是无菌滤膜原先就放在注射器里面的吗？那这个滤膜直径您选用的是多少呀？另外，为何不采用把刚果红直接灭菌呢，是怕高温灭菌过程中会影响它的结构吗？难得有人做过，希望能交流下。
赞一下 回复此楼
8楼2015-10-16 10:12:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wisemoon1988

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 容和buyer at 2015-10-16 10:12:10
非常感谢。这应该也是一种方法，可以尝试一下。能再问一下您刚果红用过滤除菌方法，具体一点是如何的。是无菌滤膜原先就放在注射器里面的吗？那这个滤膜直径您选用的是多少呀？另外，为何不采用把刚果红直接灭菌呢 ...

我们用乙醇配的刚果红溶液，没办法灭菌，所以当时选了0.22的尼龙膜，你在网上搜“灭菌一次性针式过滤器”就可以。如果你的实验等不及购买滤膜，直接称刚果红放到培养基里，再灭菌也可以。
赞一下 回复此楼
lovemyself
9楼2015-10-16 11:06:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

容和buyer

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wisemoon1988 at 2015-10-16 11:06:34
我们用乙醇配的刚果红溶液，没办法灭菌，所以当时选了0.22的尼龙膜，你在网上搜“灭菌一次性针式过滤器”就可以。如果你的实验等不及购买滤膜，直接称刚果红放到培养基里，再灭菌也可以。...

谢谢谢谢。那你们在100 ml培养基里面加了多少量的刚果红溶液呀？
你们用乙醇配刚果红也是为了杀菌吗？一般不都是用水配的吗。
赞一下 回复此楼
10楼2015-10-16 13:46:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 容和buyer 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +6 yuleib84 2026-08-19 7/350 2026-08-21 09:24 by zxg7980
[基金申请] 我面上完蛋了 +3 且听虎啸 2026-08-20 3/150 2026-08-21 09:08 by lfy8008
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +9 大萍1987 2026-08-20 11/550 2026-08-21 08:19 by littlezl
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +22 yaoyewhu2008 2026-08-20 24/1200 2026-08-21 07:44 by DanielDDDD
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 什么时候开奖？ +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭