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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 培养/筛选 » 先用透明水解圈的方法筛选产酶好的菌，请高人指点一下刚果红染色法的具体操作啊
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容和buyer

新虫 (小有名气)

[求助] 先用透明水解圈的方法筛选产酶好的菌，请高人指点一下刚果红染色法的具体操作啊 已有3人参与

查了好多文献，都没有具体讲怎么做的。涂好一般的平板后，是要把菌体留在里面倒刚果红，还是移出菌体后倒入刚果红？
如果菌体在里面就倒入刚果红的话，那加入刚果红的要灭菌吗？不灭菌的话，会不会污染菌株啊。而且到了刚果红后还要用生理盐水洗，好难洗下来。请大神给个详细点的操作步骤，谢谢谢谢万分感谢。
而且听说初筛优势菌株（产酶）还有好多种方法，了解一点的虫虫给个普及，希望多交流。谢谢。
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1楼 2015-10-15 18:54:22
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容和buyer

新虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by wisemoon1988 at 2015-10-16 14:03:10
忘记加入量了，你按照资料添加就可以了。因为我们乙醇是底物，所以用乙醇配的，你也可以用水配。我们用的乙醇浓度10%，杀不了菌。刚开始使用没有除菌的刚果红，培养基里都是杂菌，所以才过滤除菌的...

因为我一般了解到的都是在平板上倒好刚果红后再加1mg/ml的刚果后覆盖表面就可以，不知道在整个培养基中加液体刚果红需要加多少量，希望能用你们的参考一下。就以100ml培养基为例吧。望能解答。
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13楼2015-10-16 14:26:50
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随堂笔迹

金虫 (小有名气)
当然是菌体留在里面直接染，灭菌是肯定的，所有的都要灭菌，无菌操作，至于步骤随便下篇文章就有了，

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2楼2015-10-15 23:49:20
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专吃虫

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以挑几个酶圈大的，对应点在平板上，标记，然后染色原始板，这样就不要灭菌了，如果确定是要的，就做下去

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3楼2015-10-16 07:26:28
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mlanqiang

木虫之王 (文学泰斗)

蓝博士

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定一下酶的种类。
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蓝精灵
4楼2015-10-16 08:10:48
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