24小时热门版块排行榜    

查看: 1944  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

15853830932

木虫 (小有名气)

[交流] 胶回收 已有9人参与

请问一下,我用的axygen胶回收试剂盒,回收后做基因重组,一直不成功。是不是回收试剂盒里的试剂对核酸有影响?我猜测可能是有附着物之类的,使得重组酶结合不上去。不知哪位大神分析一下。。。

发自小木虫Android客户端
回复此楼
If you shed tear when you miss the sun, you also miss the stars.
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

牛红

木虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果是从正规渠道买的提取试机盒的话,你没必要怀疑商业化试剂盒有问题,如果那么大牌子的核酸提取试机盒里有对核酸形成影响的试剂的话,那axygen可以考虑退出分子生物学领域了

发自小木虫Android客户端
赢得不够是因为心智还不够高远
4楼2015-10-16 09:37:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

xiaodi1989

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-10-18 17:10:02
我以前用qiagen的胶回收也有过类似的情况。推测的原因一是回收率过低,二是回收过程对片段末端有损伤。我现在只要目的片段比较单一,我就不叫回收,使用fermentas的fast digest酶切片段和质粒,在用fastap给质粒去磷酸化,然后连接。因为fermentas的buffer是单一的,所有酶只需要热灭活既可,省时简单。
最近的一次使用胶回收是因为我用的overlapping pcr,条带很杂。我用的是sigma的盒子,一次就连上了,克隆数也比较多。
祝你实验顺利。
2楼2015-10-15 10:09:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15853830932

木虫 (小有名气)

If you shed tear when you miss the sun, you also miss the stars.
3楼2015-10-16 08:33:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨儿天0320

铜虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by 15853830932 at 2015-10-16 08:33:24
谢谢啊,我再试试

我的也是这样的结果,PCR之后条带还比较亮,但是切胶回收后再跑电泳就没有目的条带了,是不是回收效率太低了
5楼2015-10-16 10:25:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 本子写完了,给DS兄弟看了,得了92分 +3 Doma 2026-03-01 7/350 2026-03-02 00:00 by jnzsy
[考研] 0856材料与化工,270求调剂 +6 YXCT 2026-03-01 6/300 2026-03-01 23:21 by 向上的胖东
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 272求调剂 +6 田智友 2026-02-28 6/300 2026-03-01 21:40 by 公瑾逍遥
[考研] 0805总分292,求调剂 +7 幻想之殇 2026-03-01 7/350 2026-03-01 21:22 by 公瑾逍遥
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 化工299分求调剂 一志愿985落榜 +5 嘻嘻(*^ω^*) 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:47 by 无际的草原
[考研] 298求调剂 +6 axyz3 2026-02-28 6/300 2026-03-01 19:00 by 18137688336
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +5 弗格个 2026-02-28 8/400 2026-03-01 17:25 by sunny81
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 化工专硕342,一志愿大连理工大学,求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 调剂 +3 简木ChuFront 2026-02-28 3/150 2026-03-01 11:46 by 王伟要上岸啊
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
信息提示
请填处理意见