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内源mRNA与外源mRNA的识别
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做诱导iPS的实验,重编程之后用RT-PCR检测内源和外源SOX2和OCT4的表达情况 这里是怎么识别mRNA是外源基因转录出来的还是内源基因转录出来的呢? 文献是Okita用Episomal plasmid转染的那篇,我上传到附件里了 文献里提到的是用特异性的primer来识别内源或外源的,但是也只是一句话提到。。。 自己也做过一些搜索,看到说在目的基因加上tag可以区别内源或外源,但是个人理解这个tag主要是在蛋白水平的识别,去Addgene上查了一下,这3个质粒都没有tag 自己想了一下,要利用内源转录的mRNA和外源转录的mRNA序列上的差异来设计引物 但是表达的蛋白是一样的,那CDS区域应该是一样的,所以有差别的可能是UTR区域 不知道这个想法对不对 因为目前完全没有接触过实验,所以虽然是个简单的问题但是不太明白,搜索也不太能找到方向 希望各位版友不吝赐教 谢谢 |
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2015-10-14 22:46:55, 934.96 K
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