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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切效果分析
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91candy

铁虫 (小有名气)

[求助] 酶切效果分析 已有1人参与

对质粒进行了酶切，然后进行琼脂糖凝胶电泳分析。图像如下图
质粒大小为4900bp。

酶切效果分析
P看图王.jpg
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1楼 2015-10-14 17:19:13
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厚德求是

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，非常感谢。 2015-10-15 18:16:55
你意思问为什么位置关系这样的？右一道的质粒会跑的比较慢，这在分子实验中是非常正常的。右二的大小和5000差不多，直观上的位置差距可能来自实验误差，建议重复实验。

发自小木虫IOS客户端
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2楼2015-10-15 07:56:06
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jianguochen

新虫 (小有名气)
是单酶切还是双酶切，如果是单酶切，或者小插入片段的双酶切，看起来应该是切开了。
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3楼2015-10-15 09:06:22
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91candy

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jianguochen at 2015-10-15 09:06:22
是单酶切还是双酶切，如果是单酶切，或者小插入片段的双酶切，看起来应该是切开了。

单酶切，酶切质粒这个泳道看起来有两条带，不是么？没有关系吗？
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4楼2015-10-15 10:16:20
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91candy

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 厚德求是 at 2015-10-15 07:56:06
你意思问为什么位置关系这样的？右一道的质粒会跑的比较慢，这在分子实验中是非常正常的。右二的大小和5000差不多，直观上的位置差距可能来自实验误差，建议重复实验。
...

烦请给分析下酶切效果，切开了没？切的彻底么？
新手，不甚了解啊！
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5楼2015-10-15 10:17:43
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jianguochen

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 91candy at 2015-10-15 10:16:20
单酶切，酶切质粒这个泳道看起来有两条带，不是么？没有关系吗？...

两条条带说明没有酶切完全，所以环状和线性质粒都在里面。其中大的条带与右侧的质粒条带大小基本一致，说明上面部分的条带可能是没有切开的质粒。可以考虑加大酶量或者延长酶切时间。或者就这样切胶回收也行。
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6楼2015-10-15 14:07:59
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