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91candy

铁虫 (小有名气)

[求助] 酶切效果分析 已有1人参与

对质粒进行了酶切,然后进行琼脂糖凝胶电泳分析。图像如下图
质粒大小为4900bp。

酶切效果分析
P看图王.jpg
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厚德求是

金虫 (著名写手)

Ph. D. Prof.

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,非常感谢。 2015-10-15 18:16:55
你意思问为什么位置关系这样的?右一道的质粒会跑的比较慢,这在分子实验中是非常正常的。右二的大小和5000差不多,直观上的位置差距可能来自实验误差,建议重复实验。

发自小木虫IOS客户端
2楼2015-10-15 07:56:06
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jianguochen

新虫 (小有名气)

是单酶切还是双酶切,如果是单酶切,或者小插入片段的双酶切,看起来应该是切开了。
3楼2015-10-15 09:06:22
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91candy

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jianguochen at 2015-10-15 09:06:22
是单酶切还是双酶切,如果是单酶切,或者小插入片段的双酶切,看起来应该是切开了。

单酶切,酶切质粒这个泳道看起来有两条带,不是么?没有关系吗?
4楼2015-10-15 10:16:20
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91candy

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 厚德求是 at 2015-10-15 07:56:06
你意思问为什么位置关系这样的?右一道的质粒会跑的比较慢,这在分子实验中是非常正常的。右二的大小和5000差不多,直观上的位置差距可能来自实验误差,建议重复实验。
...

烦请给分析下酶切效果,切开了没?切的彻底么?
新手,不甚了解啊!
5楼2015-10-15 10:17:43
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jianguochen

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 91candy at 2015-10-15 10:16:20
单酶切,酶切质粒这个泳道看起来有两条带,不是么?没有关系吗?...

两条条带说明没有酶切完全,所以环状和线性质粒都在里面。其中大的条带与右侧的质粒条带大小基本一致,说明上面部分的条带可能是没有切开的质粒。可以考虑加大酶量或者延长酶切时间。或者就这样切胶回收也行。
6楼2015-10-15 14:07:59
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