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clf0803

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[交流] 哪些taq酶的pcr产物能直接TA克隆？

如题，请问takara的EX-taq产物能直接克隆吗？有些pfu plus 混合taq的pcr产物能直接TA克隆吗？另外，我做PCR是为了克隆表达，请问用哪种酶保真性高？

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1楼 2008-09-05 08:51:00

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greenspringmi

银虫 (正式写手)

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sutao1979(金币+1,VIP+0):谢谢参与 5-18 19:29

takara的EX-taq酶的扩增产物有A尾巴，可以直接连接T载体；
pfu酶的保真性较好，可以用该酶扩增目的片段结束后，再加A尾巴

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2楼2008-09-05 08:55:35

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hqhe

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sutao1979(金币+1,VIP+0):谢谢参与 5-18 19:29

应该说普通的taq酶都具有末端加A的功能，因此可以用于T-A克隆，具体的你只要上公司的网页看一下产品说明就可以了，这样是最可靠的
taq酶的保真性也还可以的，如果基因片段在2000以下一般是没有问题的，反正我做1500左右的片段从来就没有引入非期待突变过
pfu的保真性还是很高的，如果片段长建议使用它

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3楼2008-09-05 08:58:26

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