应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 哪些taq酶的pcr产物能直接TA克隆？
101/1返回列表
查看: 991  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 哪些taq酶的pcr产物能直接TA克隆？

如题，请问takara的EX-taq产物能直接克隆吗？有些pfu plus 混合taq的pcr产物能直接TA克隆吗？另外，我做PCR是为了克隆表达，请问用哪种酶保真性高？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-09-05 08:51:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

greenspringmi

银虫 (正式写手)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):谢谢参与 5-18 19:29
takara的EX-taq酶的扩增产物有A尾巴，可以直接连接T载体；
pfu酶的保真性较好，可以用该酶扩增目的片段结束后，再加A尾巴
赞一下(6人) 回复此楼
2楼2008-09-05 08:55:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hqhe

木虫 (正式写手)
★
sutao1979(金币+1,VIP+0):谢谢参与 5-18 19:29
应该说普通的taq酶都具有末端加A的功能，因此可以用于T-A克隆，具体的你只要上公司的网页看一下产品说明就可以了，这样是最可靠的
taq酶的保真性也还可以的，如果基因片段在2000以下一般是没有问题的，反正我做1500左右的片段从来就没有引入非期待突变过
pfu的保真性还是很高的，如果片段长建议使用它
赞一下(6人) 回复此楼
3楼2008-09-05 08:58:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biobo

铁虫 (小有名气)
ExTaq酶和rTaq酶PCR反应后都有突出的A，因此可以TA克隆；
但是高保真酶就不可以，因此，你必须反应后加A。
赞一下 回复此楼
4楼2008-09-05 09:14:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ningluztt

铜虫 (小有名气)
Taq与pfu混合使用可以实现高保真同时加A的效果
赞一下 回复此楼
5楼2008-09-05 10:12:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨后郁金香

金虫 (小有名气)
真好需要，学习了。。。
回复此楼
6楼2009-05-18 19:26:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lyjie

新虫 (初入文坛)
就是。建议不错
回复此楼
7楼2009-05-20 22:53:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

amilie030312

金虫 (正式写手)
只要是taq-bace的酶或者含有Taq的混合酶就具有3‘加A的能力，除非是那种经过特殊改造的抹平末端的Taq，但是好像没听说有这样的Taq出现，如果用Pfu能保证保真性但是都是产生平末端的，要得到3’加A还要保证保真性那就用Taq和Pfu的混合酶，或者用Pfu扩增再在3‘端加A，加一步操作嘛。
赞一下 回复此楼
8楼2009-05-21 10:56:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

legend0463

金虫 (小有名气)
除了pfu酶之外的Taq酶，其PCR产物末端应该都有A，都可以用做T-A克隆
赞一下 回复此楼
9楼2009-05-31 16:41:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 clf0803 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +5 zju2000 2026-08-16 5/250 2026-08-16 23:23 by Haru815
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭