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紫外分光光度法测定总核酸含量
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求助各位虫友~ 最近测定固态发酵中微生物的菌体量，运用的是“紫外分光光度法”检测核酸含量来表征菌体量的多少，具体方法如下：茶叶中微生物核酸的提取测定方法:取0.25g干燥培养物, 适当研磨,加入25mL 5%的三氯乙酸溶液,于80℃水浴中提取25min,其间不断进行搅拌,取出后冰浴冷却,然后8000r/min,4℃离心15 min ,稀释5倍,以5 %三氯乙酸作空白对照,于260nm处测OD值。 测OD值时遇到了麻烦，数值大幅度来回波动！  逛完各种帖后，发现可能原因有：（1）样液中含有固态杂质；(2)溶液体系不稳定，仍有反应进行。针对原因（1），进行了滤纸过滤，超滤膜过滤，低温高速离心过后，未能解决问题，说明OD值的变动很有可能是原因（2）导致；针对原因（2），将溶液长时间静置或者增大原液稀释倍数，也没能解决问题。请问各位虫友，这种情况该如何处理？是否需要用到传说中的稳定剂？如果需要，怎样才能知道是哪种稳定剂呢？ |
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铜虫 (小有名气)
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- 专业: 微生物生理与生物化学
2楼2015-11-04 22:24:31