应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 原核表达
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 881  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Deng_Cheng

铁虫 (小有名气)

[求助] 原核表达 已有3人参与

我在做咖啡碱合成途径中AMP脱氨酶的原核表达，ORF 为2571bp，现已连接pmal-c5x，转化到novablue(DE)，这个感受态是借来的，他们说pmal质粒用这个好。于是我采用他们的最佳诱导条件：28度24h。但结果好像不理想。                                                                                                                                       由于我是新手，想问以下问题：
1. 表达菌株相同而目的基因不同， 最佳诱导条件是否相同？如果同一个目的基因使用了不同的表达菌株，是否相同呢？  

2.怎么选择最佳表达菌株，主要看哪几点？

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2015-10-12 00:41:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

恶魔的左眼

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Deng_Cheng: 金币+3 2015-10-19 15:11:47
一般来说，我们会很据基因的情况去查一些资料，然后对该基因分析并优化。
目的基因不一样，一般来说诱导表达的条件也不一样，与宿主细胞的关系不算太大
表达最佳菌株重点有很多，但比较主要的是诱导表达条件的筛选，一般的蛋白表达纯化对于表达条件都需要进行梯度筛选，摸索最优表达情况，这个最麻烦了。。。
赞一下 回复此楼
早上一副睡不醒的样子，下午一副没睡醒的样子，晚上一副打了鸡血的样子！
6楼2015-10-12 17:07:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

a86052

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Deng_Cheng: 金币+4, ★有帮助 2015-10-12 16:24:02
1.目的基因不同蛋白表达很可能不同，最佳诱导条件未必相同；一个目的基因不同表达菌株，也不尽相同；
2.建议尝试不同载体、不同表达菌株、不同诱导条件，可能会有好的结果。
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-12 15:26:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黄金闪闪亮

铜虫 (小有名气)
作为本科毕业多年直到此刻又从事本行的我表示不懂
赞一下 回复此楼
3楼2015-10-12 15:45:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Deng_Cheng

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by a86052 at 2015-10-12 15:26:04
1.目的基因不同蛋白表达很可能不同，最佳诱导条件未必相同；一个目的基因不同表达菌株，也不尽相同；
2.建议尝试不同载体、不同表达菌株、不同诱导条件，可能会有好的结果。

谢谢，还想请问一下，对于我的2571bp的基因，用什么原核表达载体比较好，选择载体要对基因进行哪些分析吗？同样，选择表达菌株要对基因进行哪些分析呢？
赞一下 回复此楼
4楼2015-10-12 16:23:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 322求调剂 +6 宋明欣 2026-03-27 6/300 2026-03-28 07:08 by wangy0907
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 【求调剂】085601材料工程专硕 | 总分272 | +5 脚滑的守法公民 2026-03-27 5/250 2026-03-27 22:50 by lcl13500..
[考研] 285求调剂 +4 AZMK 2026-03-27 7/350 2026-03-27 20:59 by AZMK
[考研] 272求调剂 +7 脚滑的守法公民 2026-03-27 7/350 2026-03-27 17:23 by laoshidan
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +7 邱gl 2026-03-27 7/350 2026-03-27 15:27 by Joe率
[考研] 274求调剂 +17 顾九笙要谦虚 2026-03-24 23/1150 2026-03-27 15:16 by caszguilin
[考研] 一志愿211，335分，0856，求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 一志愿郑州大学，080500学硕，总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +4 柳溪边 2026-03-26 4/200 2026-03-26 21:14 by XPU李庆
[考研] 286求调剂 +13 Faune 2026-03-21 13/650 2026-03-26 19:52 by peike
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 机械学硕总分317求调剂！！！！ +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 6/300 2026-03-24 15:03 by 余意卿
[考研] 一志愿山东大学药学学硕求调剂 +3 开开心心没烦恼 2026-03-23 4/200 2026-03-24 00:06 by 开开心心没烦恼
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭