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Deng_Cheng铁虫 (小有名气)
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原核表达已有3人参与
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我在做咖啡碱合成途径中AMP脱氨酶的原核表达，ORF 为2571bp，现已连接pmal-c5x，转化到novablue(DE)，这个感受态是借来的，他们说pmal质粒用这个好。于是我采用他们的最佳诱导条件：28度24h。但结果好像不理想。 由于我是新手，想问以下问题： 1. 表达菌株相同而目的基因不同， 最佳诱导条件是否相同？如果同一个目的基因使用了不同的表达菌株，是否相同呢？ 2.怎么选择最佳表达菌株，主要看哪几点？ 发自小木虫IOS客户端 |
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a86052
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2楼2015-10-12 15:26:04
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Deng_Cheng
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4楼2015-10-12 16:23:24
a86052
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，可以看看是否有稀有密码子什么的。但是这个蛋白已经不小，大标签的载体可能表达效果不好。还是那句话，这个没固定的，多尝试才行5楼2015-10-12 16:50:33
恶魔的左眼
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6楼2015-10-12 17:07:54
【答案】应助回帖
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Deng_Cheng: 金币+1 2015-10-19 15:11:59
Deng_Cheng: 金币+1 2015-10-19 15:11:59
| 建议送到公司来做，比较快。仪器设备和人员都比较成熟。供参考：http://www.tolobio.com/service_detail.php?id=154 |
7楼2015-10-15 12:37:18