应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教ＰＣＲ问题
41/1返回列表
查看: 325  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 gmdp 的 5 个金币

gmdp

金虫 (小有名气)

[交流] 请教ＰＣＲ问题

我做ＳＳＲ标记时遇到一个情况，一个引物扩群体一开始扩的很好，连续扩几天后就效果越来越差，不明白是什么原因。有没有污染的原因啊？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2008-09-04 18:01:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lzhbio2005

金虫 (小有名气)
★ ★
gmdp(金币+1,VIP+0):因为我在做群体，DNA是一直在换的（每次的DNA都不一样）。所以不太可能是DNA的原因吧？
gmdp(金币+1,VIP+0):谢谢。因为我在做群体，DNA是一直在换的（每次的DNA都不一样）。所以不太可能是DNA的原因吧？
不是污染的原因，是因为每个培养皿上能挑的斑数是有数的。如果你都挑出来，肯定会有重复的。后来的结果不好也很正常。可能是你没有转化进去吧。
赞一下(4人) 回复此楼
2楼2008-09-04 18:08:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shenye.judy

木虫 (正式写手)
★ ★
gmdp(金币+1,VIP+0):是同一个引物。并且DNA是每次都在换的。我实地搞不清楚了，遇到好几次这种情况了
gmdp(金币+1,VIP+0):谢谢。因为我在做群体，DNA是一直在换的（每次的DNA都不一样）。所以不太可能是DNA的原因吧？
如果扩增条件都一样，后来不好，那可能是模板的问题了。
如果说污染，可能是引物了？（如果你一直在用一种引物，不大可能污染）
要不换换PCR用的东西了，镁离子、dntp、酶、buffer。
还有PCR仪稳定吗？程序没问题吧？
做的时候注意，不要让酶失活了。
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2008-09-04 18:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ntill

银虫 (小有名气)
★
gmdp(金币+1,VIP+0):是同一个引物。并且DNA是每次都在换的。我实地搞不清楚了，遇到好几次这种情况了
一个引物扩群体一开始扩的很好，连续扩几天后就效果越来越差。

同一个引物？？什么样的效果？？？
首先要介绍清楚大家才能帮你分析
当然，各个实验室的情况都不同，最好问问同实验室同样做PCR的同学的意见更有参考价值。我们外面的人就只能猜是什么样的原因了
赞一下(1人) 回复此楼
天哪，什么时候才能有100个金币啊！
4楼2008-09-04 21:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 gmdp 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 3/150 2026-11-10 01:40 by FChKX8meu1ds
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 01:29 by FChKX8meu1ds
[考博] 27博士申请 +3 白白白ly 2026-11-09 3/150 2026-11-09 21:39 by szq0819
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭