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马淑凤msf

银虫 (小有名气)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 鹄的什么的 at 2015-10-12 20:35:21
个人认为,问题不在于没有PCR产物,只是PCR产物里面混的有蛋白质之类的东西,造成了凝胶阻滞,影响了核酸的电泳行为。maker能够跑开说明TAE或者TBE没有问题,如果能够排除loading buffer的问题的话,应该是你的PCR体 ...

请问大神,我也是新手,最近老是出现上述的问题,是不是56℃水浴2-3min可以所以改善.你有类似的经验,解决了问题没的哦.
一切缘于已,一切也止于已,活出自我,才是人生的交响曲!
21楼2015-10-15 22:12:20
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yaohuaibing

铁杆木虫 (著名写手)

阴性的
每天都在读书和读人。书易懂,人难解。
22楼2015-10-15 22:54:04
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鹄的什么的

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
21楼: Originally posted by 马淑凤msf at 2015-10-15 22:12:20
请问大神,我也是新手,最近老是出现上述的问题,是不是56℃水浴2-3min可以所以改善.你有类似的经验,解决了问题没的哦....

分子克隆实验指南上面说的很清楚,当反应体系太小或者低温储存时间久的话就会出现这种情况,上面提示的解决方法就是这个水浴。我试过,没有问题

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23楼2015-10-16 10:18:08
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zyyyyyyy

新虫 (初入文坛)

你是不是模板量加太多了,建议大大减少模板量试试看。如果不行的话,检查下体系有没有问题,一般电泳液什么的不会造成这样的影响。
24楼2015-10-16 12:28:54
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马淑凤msf

银虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
23楼: Originally posted by 鹄的什么的 at 2015-10-16 10:18:08
分子克隆实验指南上面说的很清楚,当反应体系太小或者低温储存时间久的话就会出现这种情况,上面提示的解决方法就是这个水浴。我试过,没有问题...

谢谢!!!
一切缘于已,一切也止于已,活出自我,才是人生的交响曲!
25楼2015-10-16 12:50:07
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匿名

用户注销 (著名写手)

本帖仅楼主可见
26楼2015-10-16 12:51:36
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足下客

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 董小露 at 2015-10-12 18:02:10
我这次换缓冲液了,可是还是那样。。。我的模板是4度保存的,以前也是这么放着的,没有出现过这种问题,还有哪里可能出问题了么...

你以前跑出来过的条带可以上图看一下吗?还有你的PCR体系的配置和PCR的反应条件?还有你的目的片段是多大?仔细看了一下你跑的电泳,样本孔的泳带是有条带的,只是不明显(因为背景太亮了,不好分辨),你的模板用的是什么?感觉你PCR的反应条件应该不是很成熟,有非特异性扩增
27楼2015-10-19 16:08:09
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足下客

木虫 (正式写手)

我记得以前跑菌落电泳好像也遇到过这种情况,因为菌落电泳含的杂质比较多,会受到干扰。
28楼2015-10-19 16:10:19
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