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crescent010

铁虫 (初入文坛)

[求助] 巢式pcr第一轮电泳没有产物,还能进行第二轮么? 已有1人参与

一直在做race克隆基因,一直片段是转录组测出来的不完整片段。
实验室常用的方法是巢式+降落,每一轮巢式都是套着降落做的。
之前的师兄师姐都有克出来目的基因。
我是做转录因子的,一般第一轮很少会扩出条带,基本上没有条带。但是第二轮能扩出来,可是回收后测序都不是我要的目的片段。
请问是不是巢式一定要第一轮扩出条带,才能进行第二轮?
还有我第一轮扩不出条带是模板的问题还是引物的问题?或是其他原因。
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越加油

新虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
crescent010: 金币+2, 有帮助 2015-10-11 23:07:54
一轮没有条带,可以进行二轮扩增。但是race实验不太好做,加油,本人做了半年没有任何结果~~
2楼2015-10-10 17:28:38
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BBMC-2012

木虫 (知名作家)


必须二轮,二轮才能确定

发自小木虫Android客户端
3楼2015-10-10 20:48:32
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crescent010

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 越加油 at 2015-10-10 17:28:38
一轮没有条带,可以进行二轮扩增。但是race实验不太好做,加油,本人做了半年没有任何结果~~

我做了快一年了,没有任何结果
4楼2015-10-11 23:07:36
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 越加油 at 2015-10-10 17:28:38
一轮没有条带,可以进行二轮扩增。但是race实验不太好做,加油,本人做了半年没有任何结果~~

一轮产物需要稀释吗?
需要胶回收吗?有好多条带

发自小木虫Android客户端
5楼2016-06-09 21:06:59
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