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crescent010铁虫 (初入文坛)
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巢式pcr第一轮电泳没有产物,还能进行第二轮么? 已有1人参与
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一直在做race克隆基因,一直片段是转录组测出来的不完整片段。 实验室常用的方法是巢式+降落,每一轮巢式都是套着降落做的。 之前的师兄师姐都有克出来目的基因。 我是做转录因子的,一般第一轮很少会扩出条带,基本上没有条带。但是第二轮能扩出来,可是回收后测序都不是我要的目的片段。 请问是不是巢式一定要第一轮扩出条带,才能进行第二轮? 还有我第一轮扩不出条带是模板的问题还是引物的问题?或是其他原因。 |
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