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z他山之石

银虫 (初入文坛)

[求助] DNS(3,5 -二硝基水杨酸)法测葡萄糖浓度 已有4人参与

各位龙神,我用DNS(3,5 -二硝基水杨酸)法测葡萄糖浓度,出现了很多问题,想请教各位。
DNS配制步骤如下:
1.称取DNS(0.63g)加水50ml,水浴45度;
2.逐步加入氢氧化钠(0.21g)溶液,(26.2ml的2mol/L NaOH溶液,0.21g氢氧化钠溶于26.2ml水)同时不断搅拌,直到溶液清澈透明;(a.药品中的氢氧化钠要配制成溶液;直接加颗粒,可能产生鸡蛋花;b.加入氢氧化钠溶液时,溶液的温度会上升,所以要慢慢加,不停地搅拌,同时溶液的温度不能超过48度;温度高了,溶液颜色变黑。)
3.逐步加入四水酒石酸钾钠(18.5g)、苯酚(0.5g)和无水亚硫酸钠(0.5g);(顺序最好不要更改!)
4.继续45度水浴,同时补水,不断搅拌,直到加入的物质完全溶解;(一定要有耐心地搅拌!)  5.停止加热,冷却至室温,用水定容至100ml。
6.烧结玻璃漏斗过滤(过滤与否,影响不大。)
7.储存在棕色瓶中,避光保存。室温下存放7天后使用
由于实验室没有蒸馏水,我用了去离子水代替,不知道有没有影响??
然后用1mg/mL的葡萄糖溶液和DNS反应,可是颜色没有明显的变化,没有棕红色出现,下图1左1是用1mL的DNS和1mL的去离子水,左2是1mL的DNS和1mL的葡萄糖溶液反应,其他左3我又加了一点固体葡萄糖,左4我用麦芽糖和DNS反应,反应均在100摄氏度烘箱中烘了十分钟,,,可是颜色好像都没啥变化。。图2和图3是我在网上搜到的两个图,这个颜色差别就很明显。
上次用分光计测过,也没结果,峰不明显,而且峰值和葡萄糖浓度关系也不大。
想请教做过这个实验的虫友们,这个问题到底出在哪了。。求大家不吝赐教,谢谢!!

DNS(3,5 -二硝基水杨酸)法测葡萄糖浓度
图1.jpg


DNS(3,5 -二硝基水杨酸)法测葡萄糖浓度-1
图2.jpg


DNS(3,5 -二硝基水杨酸)法测葡萄糖浓度-2
图3.jpg
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看见自己

铁杆木虫 (知名作家)

4楼2016-03-28 23:02:03
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

suruiqin: 你好,分析版是专业版块,如果不是应助,请不要点应助回帖,谢谢合作 2015-12-10 13:29:32
道友你好  我也是做了DNS法 加热之后 发现空白对照和标准样品测得OD 也是0
生命不息奋斗不止
2楼2015-12-10 12:39:33
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sudonghai77

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

配方一样,去离子水应该没有关系。个人用的比色管,先加1ml葡萄糖,然后加1ml蒸馏水,加1.5mlDNS ,摇匀。加热的时候是在沸水浴中加热,电磁炉加个锅保持煮沸。加热5分钟,很快就有颜色变化。

如果还没有可能是DNS哪个试剂有问题吧。。
3楼2016-03-28 21:05:02
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wxyabc27

铜虫 (小有名气)

6.烧结玻璃漏斗过滤(过滤与否,影响不大)
请问一下烧结玻璃漏斗是什么东西啊,有图片吗?我用的标准上也说要用这个东西,但不知道是什么,求教。
mininightingale
5楼2017-05-05 14:08:59
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