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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » gateway attB接头序列的问题
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qauzgd

铁虫 (初入文坛)

[求助] gateway attB接头序列的问题

近期要利用gateway构建载体，很多论文里提到PCR引物中attB接头序列都是如下：
GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCT
GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGT
但是也有论文采用如下序列对
GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCT
ATCCCTGTCACCTCCGCTACCCAGCTTTT

所以新手求问，attB接头是必须按第一组的设计，还是只要在重组酶的识别区域选一段就可以呢；第二组的接头序列经过重组后会不会影响目的序列从pDONR到pHELLSGATE的进一步反应呢，谢谢大家！
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1楼 2015-10-09 12:16:04
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qauzgd

铁虫 (初入文坛)
=.= 可能没说明白，楼主就是想知道用attB1B2是不是就可以啦。或者做过BP,LR反应的亲们，你们用的接头序列是啥。。。谢谢！
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2楼2015-10-09 17:14:24
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