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qauzgd

铁虫 (初入文坛)

[求助] gateway attB接头序列的问题

近期要利用gateway构建载体,很多论文里提到PCR引物中attB接头序列都是如下:
GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCT
GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGT
但是也有论文采用如下序列对
GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCT
ATCCCTGTCACCTCCGCTACCCAGCTTTT

所以新手求问,attB接头是必须按第一组的设计,还是只要在重组酶的识别区域选一段就可以呢;第二组的接头序列经过重组后会不会影响目的序列从pDONR到pHELLSGATE的进一步反应呢,谢谢大家!
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qauzgd

铁虫 (初入文坛)

=.= 可能没说明白,楼主就是想知道用attB1B2是不是就可以啦。或者做过BP,LR反应的亲们,你们用的接头序列是啥。。。谢谢!
2楼2015-10-09 17:14:24
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