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邪恶的大肉丸

金虫 (著名写手)

[求助] 请问生物工程大致是个什么流程。 已有1人参与

在百度检索到一句这样的话 “科学家们把人的胰岛素基因送到大肠杆菌的细胞里,让胰岛素基因和大肠杆菌的遗传物质相结合”。

想问下:1 人类胰岛素基因 通过 什么手段 “送”到大肠杆菌的细胞里。
2 怎么“让胰岛素基因和大肠杆菌的遗传物质相结合”

这两部都涉及到什么具体技术。求详解。
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huangxin2011

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【答案】应助回帖

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邪恶的大肉丸: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 非常感谢! 导入外源基因的时候,怎么控制导入的是只是一条链呢 2015-10-08 16:26:06
额,我不知道楼主搜索到的是关于什么内容的帖子。
一般导入外源基因有两种方法,热激法和电转法。反正就是让携带目的基因的载体进入到大肠杆菌中。
胰岛素是真核基因,而大肠杆菌是原核生物。因此需要真核表达系统,也就是可以将胰岛素基因翻译成蛋白质的系统,一起转入大肠杆菌,它们并没有与大肠杆菌的DNA结合,只是独立于大肠杆菌完成自己的复制和翻译。
2楼2015-10-08 16:03:52
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邪恶的大肉丸

金虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by huangxin2011 at 2015-10-08 16:03:52
额,我不知道楼主搜索到的是关于什么内容的帖子。
一般导入外源基因有两种方法,热激法和电转法。反正就是让携带目的基因的载体进入到大肠杆菌中。
胰岛素是真核基因,而大肠杆菌是原核生物。因此需要真核表达系统 ...

非常感谢,能否介绍下电转法,或者有什么比较典型的教材或文献。
3楼2015-10-08 16:25:08
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huangxin2011

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电转化法就是利用短暂的高电压,施加到菌体和外源DNA混合物上,电击能使菌体外壁出现孔洞,这样外源DNA就可以进入菌体了。书本的话,分子生物学之类的书上应该都有的。看来楼主是刚刚涉及这个领域的样子
4楼2015-10-08 16:40:30
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huangxin2011

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一般来说,热激法还是很普遍的,毕竟感受态细胞可以自己做,买的话也很便宜。电转用的电击杯实在有点贵。
5楼2015-10-08 16:55:02
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邪恶的大肉丸

金虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by huangxin2011 at 2015-10-08 16:40:30
电转化法就是利用短暂的高电压,施加到菌体和外源DNA混合物上,电击能使菌体外壁出现孔洞,这样外源DNA就可以进入菌体了。书本的话,分子生物学之类的书上应该都有的。看来楼主是刚刚涉及这个领域的样子

是啊,刚刚开始接触哇。多谢指点,多谢指点!当年克隆羊多利,将染色体注入胚胎细胞是通过什么技术的呢,下到了原文,但完全看不懂的说,忘指点一二。http://www.nature.com/nature/journal/v380/n6569/pdf/380064a0.pdf
6楼2015-10-09 11:04:19
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huangxin2011

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引用回帖:
6楼: Originally posted by 邪恶的大肉丸 at 2015-10-09 11:04:19
是啊,刚刚开始接触哇。多谢指点,多谢指点!当年克隆羊多利,将染色体注入胚胎细胞是通过什么技术的呢,下到了原文,但完全看不懂的说,忘指点一二。http://www.nature.com/nature/journal/v380/n6569/pdf/380064 ...

这个不太清楚哎,应该也是类似于电击,但是染色体如此大的分子,我们一般也就转入几kb大小的质粒而已。
7楼2015-10-09 12:23:06
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邪恶的大肉丸

金虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by huangxin2011 at 2015-10-09 12:23:06
这个不太清楚哎,应该也是类似于电击,但是染色体如此大的分子,我们一般也就转入几kb大小的质粒而已。...

好的,谢谢了。
8楼2015-10-09 13:47:50
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