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邪恶的大肉丸

金虫 (著名写手)

[求助] 请问生物工程大致是个什么流程。 已有1人参与

在百度检索到一句这样的话 “科学家们把人的胰岛素基因送到大肠杆菌的细胞里，让胰岛素基因和大肠杆菌的遗传物质相结合”。

想问下：1 人类胰岛素基因 通过 什么手段 “送”到大肠杆菌的细胞里。
2 怎么“让胰岛素基因和大肠杆菌的遗传物质相结合”

这两部都涉及到什么具体技术。求详解。
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1楼 2015-10-08 15:46:17
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huangxin2011

捐助贵宾 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
邪恶的大肉丸: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 非常感谢！ 导入外源基因的时候，怎么控制导入的是只是一条链呢 2015-10-08 16:26:06
额，我不知道楼主搜索到的是关于什么内容的帖子。
一般导入外源基因有两种方法，热激法和电转法。反正就是让携带目的基因的载体进入到大肠杆菌中。
胰岛素是真核基因，而大肠杆菌是原核生物。因此需要真核表达系统，也就是可以将胰岛素基因翻译成蛋白质的系统，一起转入大肠杆菌，它们并没有与大肠杆菌的DNA结合，只是独立于大肠杆菌完成自己的复制和翻译。
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2楼2015-10-08 16:03:52
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邪恶的大肉丸

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huangxin2011 at 2015-10-08 16:03:52
额，我不知道楼主搜索到的是关于什么内容的帖子。
一般导入外源基因有两种方法，热激法和电转法。反正就是让携带目的基因的载体进入到大肠杆菌中。
胰岛素是真核基因，而大肠杆菌是原核生物。因此需要真核表达系统 ...

非常感谢，能否介绍下电转法，或者有什么比较典型的教材或文献。
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3楼2015-10-08 16:25:08
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huangxin2011

捐助贵宾 (小有名气)
电转化法就是利用短暂的高电压，施加到菌体和外源DNA混合物上，电击能使菌体外壁出现孔洞，这样外源DNA就可以进入菌体了。书本的话，分子生物学之类的书上应该都有的。看来楼主是刚刚涉及这个领域的样子
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4楼2015-10-08 16:40:30
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huangxin2011

捐助贵宾 (小有名气)
一般来说，热激法还是很普遍的，毕竟感受态细胞可以自己做，买的话也很便宜。电转用的电击杯实在有点贵。
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5楼2015-10-08 16:55:02
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邪恶的大肉丸

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by huangxin2011 at 2015-10-08 16:40:30
电转化法就是利用短暂的高电压，施加到菌体和外源DNA混合物上，电击能使菌体外壁出现孔洞，这样外源DNA就可以进入菌体了。书本的话，分子生物学之类的书上应该都有的。看来楼主是刚刚涉及这个领域的样子

是啊，刚刚开始接触哇。多谢指点，多谢指点！当年克隆羊多利，将染色体注入胚胎细胞是通过什么技术的呢，下到了原文，但完全看不懂的说，忘指点一二。http://www.nature.com/nature/journal/v380/n6569/pdf/380064a0.pdf
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6楼2015-10-09 11:04:19
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huangxin2011

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 邪恶的大肉丸 at 2015-10-09 11:04:19
是啊，刚刚开始接触哇。多谢指点，多谢指点！当年克隆羊多利，将染色体注入胚胎细胞是通过什么技术的呢，下到了原文，但完全看不懂的说，忘指点一二。http://www.nature.com/nature/journal/v380/n6569/pdf/380064 ...

这个不太清楚哎，应该也是类似于电击，但是染色体如此大的分子，我们一般也就转入几kb大小的质粒而已。
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7楼2015-10-09 12:23:06
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邪恶的大肉丸

金虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by huangxin2011 at 2015-10-09 12:23:06
这个不太清楚哎，应该也是类似于电击，但是染色体如此大的分子，我们一般也就转入几kb大小的质粒而已。...

好的，谢谢了。
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8楼2015-10-09 13:47:50
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