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小猪漫步210

金虫 (正式写手)

[求助] 慢病毒转染细胞带荧光 已有6人参与

各位大神,有没有做过慢病毒转染细胞使细胞带荧光的?我按照卖家的说明做了,可是做出来的荧光效果特别差。
当时卖家跟我说在25毫升培养皿里面培养细胞,加入100微升的慢病毒,培养两天就可以了,但是我现在看到转染率百分之一左右。各位有没有做过类似的实验的?详细步骤最好。
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小猪漫步210

金虫 (正式写手)

大神过来看看
2楼2015-10-06 13:26:43
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小猪漫步210

金虫 (正式写手)

没有人做过么?
3楼2015-10-06 21:57:04
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小猪漫步210

金虫 (正式写手)

求指导
4楼2015-10-06 21:57:15
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匿名

用户注销 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小猪漫步210: 金币+5, 有帮助 2015-10-07 10:12:40
本帖仅楼主可见
5楼2015-10-06 22:45:41
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

lxzk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你什么信息都没提供,什么细胞系,慢病毒滴度,有没有抗性,做没做筛选。
6楼2015-10-07 04:35:42
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thetc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小猪漫步210: 金币+5, 有帮助 2015-10-07 10:10:41
25ml培养皿是什么规格?d150吗?而且实验说的不太清楚 需要了解一些你的实验背景。细胞系是?转染试剂加了吗 比例如何,转染操作是怎么样的?很多因素都会影响

发自小木虫IOS客户端
加入,希望能学习多一点
7楼2015-10-07 07:36:26
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小猪漫步210

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by thetc at 2015-10-07 07:36:26
25ml培养皿是什么规格?d150吗?而且实验说的不太清楚 需要了解一些你的实验背景。细胞系是?转染试剂加了吗 比例如何,转染操作是怎么样的?很多因素都会影响

你好,转染试剂是什么?我用的培养瓶,,,写错了,加了100微升的病毒,TU值是10^8.细胞系是HUVEC和HepG2
8楼2015-10-07 10:12:15
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小猪漫步210

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by pf790352975 at 2015-10-06 22:45:41
哪个公司做的慢病毒包装

深圳博奥康,,,,他们自己做的包装
9楼2015-10-07 10:13:15
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小猪漫步210

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by lxzk at 2015-10-07 04:35:42
你什么信息都没提供,什么细胞系,慢病毒滴度,有没有抗性,做没做筛选。

慢病毒低度是10^8,什么是抗性?没有做筛选,,,,不知道咋做,我就想让我的细胞有荧光就行,卖病毒的跟我说你就把这个病毒加到培养基里面,大概是25毫升的培养瓶100微升就够了。
10楼2015-10-07 10:16:07
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