应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 慢病毒转染细胞带荧光
汕头大学海洋科学接受调剂
162/2返回列表上一页12
查看: 4048  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

thetc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小猪漫步210: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-10-08 17:14:20
引用回帖:
10楼: Originally posted by 小猪漫步210 at 2015-10-07 10:16:07
慢病毒低度是10^8，什么是抗性？没有做筛选，，，，不知道咋做，我就想让我的细胞有荧光就行，卖病毒的跟我说你就把这个病毒加到培养基里面，大概是25毫升的培养瓶100微升就够了。...

病毒包装好后   一个病毒带有3个以上的环状遗传物质，一个是用于包装的，一个是用于组装的 还有一个是你的目的基因相关的（荧光蛋白）。 如果你需要将有荧光的细胞比例增加的话，只需要知道你的目的基因质粒上带有什么抗性基因就可以了。  将你的细胞加入带有相应抗生素的培养基中，过几天换培养基 之后剩下的就是 荧光蛋白有表达的 细胞。
赞一下 回复此楼
加入，希望能学习多一点
11楼2015-10-07 15:09:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bluerivers

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先根据抗性筛选一下看一下。抗性是你目的基因所在载体的真核抗性
赞一下 回复此楼
12楼2015-10-07 20:27:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (著名写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
13楼2015-10-07 22:03:47
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲，勿施于人

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
按理说用慢病毒效率应该能达到90%以上，1%肯定是哪里有问题，出问题可能是很多环节
比如，病毒感染的时候加polybrene了吗？
可以多加一点病毒，然后做一遍抗生素筛选，荧光要在感染48-72小时后观察，一定要做阴性对照
你确定用的病毒是可以感染你要用的细胞的吗？比如说MMLV类的病毒只能感染老鼠细胞，所以对3T3有用，但是对HeLa没效果
赞一下 回复此楼
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
14楼2015-10-08 00:25:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

影魔在暴走

新虫 (小有名气)
要加转染剂，商用转染剂很好用，转染效率一般都在80%以上

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
15楼2015-10-08 00:34:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dx2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先你要确定你买的病毒有木有滴度，，你必须做个对照，，，其次你买的病毒能不能够感染你的细胞，，这个要你自己差文献，，最后你在看时间，不知道你的GFP的启动子是哪一个，产生荧光的时间快慢不一样的
赞一下 回复此楼
16楼2015-10-08 10:03:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小猪漫步210 的主题更新
162/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 297，工科调剂?河南农业大学本科 +10 河南农业大学-能 2026-04-14 10/500 2026-04-15 13:30 by 西北望—风沙
[考研] 297，工科调剂? +7 河南农业大学-能 2026-04-14 7/350 2026-04-15 13:26 by 西北望—风沙
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +3 白云123456789 2026-04-13 3/150 2026-04-15 12:42 by 西北望—风沙
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-11 13/650 2026-04-14 19:18 by Art1977
[考研] 367求调剂 +11 hffQAQ 2026-04-09 11/550 2026-04-14 17:48 by lhj2009
[考研] 求调剂 +20 MAX怅惘 2026-04-09 22/1100 2026-04-14 14:57 by 独醉梦孤城
[考研] 机械还有还有名额吗？太难了 +8 笑笑袁 2026-04-10 8/400 2026-04-14 08:44 by screening
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +26 土豆er? 2026-04-09 29/1450 2026-04-13 15:15 by 独醉梦孤城
[考研] 材料考研调剂 +29 云木达达 2026-04-11 31/1550 2026-04-13 13:32 by lyh鲁老师
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 322求调剂 +6 123安康 2026-04-12 13/650 2026-04-12 15:51 by 123安康
[考研] 一志愿西北工业大学289 085602 +33 yang婷 2026-04-10 34/1700 2026-04-12 08:11 by Art1977
[考研] 299求调剂 +8 ZVVZ13 2026-04-08 8/400 2026-04-12 00:40 by 蓝云思雨
[考研] 283求调剂 086004考英二数二 +17 那个噜子 2026-04-10 18/900 2026-04-11 16:27 by 明月此时有
[考研] 调剂 +5 文道星台 2026-04-11 5/250 2026-04-11 15:01 by 凯凯要变帅
[考研] 346，工科0854求调剂，专硕 +7 moser233 2026-04-10 8/400 2026-04-11 08:52 by 猪会飞
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +9 你让我怎么荔枝 2026-04-10 10/500 2026-04-11 08:33 by zhq0425
[考研] 材料与化工调剂 +12 否极泰来2026 2026-04-10 13/650 2026-04-11 00:28 by wangjihu
[考研] 332，085601求调剂 +12 ydfyh 2026-04-09 14/700 2026-04-09 17:28 by wp06
[考研] 348求调剂 +3 candyyyi 2026-04-09 3/150 2026-04-09 17:20 by 段伟艳
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭