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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 微生物、发酵 » 淀粉酶可以用煮沸一个小时的方法纯化吗？
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tuhangul622

金虫 (小有名气)

[求助] 淀粉酶可以用煮沸一个小时的方法纯化吗？ 已有1人参与

淀粉酶可以用煮沸一个小时的方法纯化吗？

     导师让我从乳酸菌发酵液中提完粗酶以后，去煮沸一个小时在跑电泳，说煮沸一个小时就可以纯化这个淀粉酶，但是我实在找不到这个方法的理论依据，不知道怎么弄，希望大虾们帮个忙
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人的一生可以没有荣誉和鲜花，可不能没有自尊！
1楼 2015-09-28 21:16:10
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junqing

金虫 (正式写手)
乳酸菌不是不可以利用淀粉的吗？怎么还可以产淀粉酶

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6楼2016-01-31 21:22:03
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
tuhangul622(99503102代发): 金币+1, 谢谢应助！希望继续关注食品版噢！ 2015-09-29 09:50:45
tuhangul622(99503102代发): 金币+2, 谢谢应助！ 2016-01-30 20:45:31
sytucom: 金币+2, 回帖精彩，谢谢参与 2016-01-31 23:27:08
煮沸，其它蛋白变性了，淀粉酶耐高温，煮沸不会变性，变性蛋白一离心会沉淀。淡粉酶还在溶液中。就分开了，就这么简单。
理解两点：
1.大多蛋白在煮沸情况下都会发生不可逆变性，淡粉酶是耐高温的蛋白，不会变性。
2.变性的蛋白会凝集起来，离心过过滤就除掉了。

祝顺利。
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2楼2015-09-29 09:07:51
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tuhangul622

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-29 09:07:51
煮沸，其它蛋白变性了，淀粉酶耐高温，煮沸不会变性，变性蛋白一离心会沉淀。淡粉酶还在溶液中。就分开了，就这么简单。
理解两点：
1.大多蛋白在煮沸情况下都会发生不可逆变性，淡粉酶是耐高温的蛋白，不会变性。 ...

谢谢你，想想也就这么回事，我煮沸以后测它的酶活性好像有增大的现象，那么用这种方法纯化的淀粉酶不许要过层析柱是吧？

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人的一生可以没有荣誉和鲜花，可不能没有自尊！
3楼2015-09-30 09:48:01
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
tuhangul622(99503102代发): 金币+2, 谢谢你的无私解答，继续加油！ 2015-10-06 10:36:51
引用回帖:
3楼: Originally posted by tuhangul622 at 2015-09-30 09:48:01
谢谢你，想想也就这么回事，我煮沸以后测它的酶活性好像有增大的现象，那么用这种方法纯化的淀粉酶不许要过层析柱是吧？
...

看你要求的纯度，你煮过后在离心，离心后跑个SDS-PAGE看看，根据你的用途看是否需要层析。过不过层析与你最后的要求有关，一般煮下纯度70-80%纯度是有的，杂蛋白还是有的。

煮后酶活增加正常，杂蛋白没了，葡萄糖苷转移酶也没了，测的酶活自然就高了。祝顺利
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4楼2015-09-30 10:19:46
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