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tuhangul622

金虫 (小有名气)

[求助] 淀粉酶可以用煮沸一个小时的方法纯化吗? 已有1人参与

淀粉酶可以用煮沸一个小时的方法纯化吗?

     导师让我从乳酸菌发酵液中提完粗酶以后,去煮沸一个小时在跑电泳,说煮沸一个小时就可以纯化这个淀粉酶,但是我实在找不到这个方法的理论依据,不知道怎么弄,希望大虾们帮个忙
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hc-material

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【答案】应助回帖

★ ★
tuhangul622(99503102代发): 金币+2, 谢谢你的无私解答,继续加油! 2015-10-06 10:36:51
引用回帖:
3楼: Originally posted by tuhangul622 at 2015-09-30 09:48:01
谢谢你,想想也就这么回事,我煮沸以后测它的酶活性好像有增大的现象,那么用这种方法纯化的淀粉酶不许要过层析柱是吧?
...

看你要求的纯度,你煮过后在离心,离心后跑个SDS-PAGE看看,根据你的用途看是否需要层析。过不过层析与你最后的要求有关,一般煮下纯度70-80%纯度是有的,杂蛋白还是有的。

煮后酶活增加正常,杂蛋白没了,葡萄糖苷转移酶也没了,测的酶活自然就高了。祝顺利
4楼2015-09-30 10:19:46
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hc-material

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
tuhangul622(99503102代发): 金币+1, 谢谢应助!希望继续关注食品版噢! 2015-09-29 09:50:45
tuhangul622(99503102代发): 金币+2, 谢谢应助! 2016-01-30 20:45:31
sytucom: 金币+2, 回帖精彩,谢谢参与 2016-01-31 23:27:08
煮沸,其它蛋白变性了,淀粉酶耐高温,煮沸不会变性,变性蛋白一离心会沉淀。淡粉酶还在溶液中。就分开了,就这么简单。
理解两点:
1.大多蛋白在煮沸情况下都会发生不可逆变性,淡粉酶是耐高温的蛋白,不会变性。
2.变性的蛋白会凝集起来,离心过过滤就除掉了。

祝顺利。
2楼2015-09-29 09:07:51
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tuhangul622

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-29 09:07:51
煮沸,其它蛋白变性了,淀粉酶耐高温,煮沸不会变性,变性蛋白一离心会沉淀。淡粉酶还在溶液中。就分开了,就这么简单。
理解两点:
1.大多蛋白在煮沸情况下都会发生不可逆变性,淡粉酶是耐高温的蛋白,不会变性。 ...

谢谢你,想想也就这么回事,我煮沸以后测它的酶活性好像有增大的现象,那么用这种方法纯化的淀粉酶不许要过层析柱是吧?

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3楼2015-09-30 09:48:01
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tuhangul622

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-30 10:19:46
看你要求的纯度,你煮过后在离心,离心后跑个SDS-PAGE看看,根据你的用途看是否需要层析。过不过层析与你最后的要求有关,一般煮下纯度70-80%纯度是有的,杂蛋白还是有的。

煮后酶活增加正常,杂蛋白没了,葡萄 ...

谢谢楼主

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5楼2015-09-30 12:51:09
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