24小时热门版块排行榜    

查看: 1367  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

tuhangul622

金虫 (小有名气)

[求助] 淀粉酶可以用煮沸一个小时的方法纯化吗? 已有1人参与

淀粉酶可以用煮沸一个小时的方法纯化吗?

     导师让我从乳酸菌发酵液中提完粗酶以后,去煮沸一个小时在跑电泳,说煮沸一个小时就可以纯化这个淀粉酶,但是我实在找不到这个方法的理论依据,不知道怎么弄,希望大虾们帮个忙
回复此楼
人的一生可以没有荣誉和鲜花,可不能没有自尊!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
tuhangul622(99503102代发): 金币+2, 谢谢你的无私解答,继续加油! 2015-10-06 10:36:51
引用回帖:
3楼: Originally posted by tuhangul622 at 2015-09-30 09:48:01
谢谢你,想想也就这么回事,我煮沸以后测它的酶活性好像有增大的现象,那么用这种方法纯化的淀粉酶不许要过层析柱是吧?
...

看你要求的纯度,你煮过后在离心,离心后跑个SDS-PAGE看看,根据你的用途看是否需要层析。过不过层析与你最后的要求有关,一般煮下纯度70-80%纯度是有的,杂蛋白还是有的。

煮后酶活增加正常,杂蛋白没了,葡萄糖苷转移酶也没了,测的酶活自然就高了。祝顺利
4楼2015-09-30 10:19:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
tuhangul622(99503102代发): 金币+1, 谢谢应助!希望继续关注食品版噢! 2015-09-29 09:50:45
tuhangul622(99503102代发): 金币+2, 谢谢应助! 2016-01-30 20:45:31
sytucom: 金币+2, 回帖精彩,谢谢参与 2016-01-31 23:27:08
煮沸,其它蛋白变性了,淀粉酶耐高温,煮沸不会变性,变性蛋白一离心会沉淀。淡粉酶还在溶液中。就分开了,就这么简单。
理解两点:
1.大多蛋白在煮沸情况下都会发生不可逆变性,淡粉酶是耐高温的蛋白,不会变性。
2.变性的蛋白会凝集起来,离心过过滤就除掉了。

祝顺利。
2楼2015-09-29 09:07:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tuhangul622

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-29 09:07:51
煮沸,其它蛋白变性了,淀粉酶耐高温,煮沸不会变性,变性蛋白一离心会沉淀。淡粉酶还在溶液中。就分开了,就这么简单。
理解两点:
1.大多蛋白在煮沸情况下都会发生不可逆变性,淡粉酶是耐高温的蛋白,不会变性。 ...

谢谢你,想想也就这么回事,我煮沸以后测它的酶活性好像有增大的现象,那么用这种方法纯化的淀粉酶不许要过层析柱是吧?

[ 发自小木虫客户端 ]
人的一生可以没有荣誉和鲜花,可不能没有自尊!
3楼2015-09-30 09:48:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tuhangul622

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-30 10:19:46
看你要求的纯度,你煮过后在离心,离心后跑个SDS-PAGE看看,根据你的用途看是否需要层析。过不过层析与你最后的要求有关,一般煮下纯度70-80%纯度是有的,杂蛋白还是有的。

煮后酶活增加正常,杂蛋白没了,葡萄 ...

谢谢楼主

[ 发自小木虫客户端 ]
人的一生可以没有荣誉和鲜花,可不能没有自尊!
5楼2015-09-30 12:51:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 4/200 2026-11-15 06:50 by xSrQNSSjcgoX
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:44 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:22 by xSrQNSSjcgoX
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:11 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:00 by xSrQNSSjcgoX
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 7/350 2026-11-15 03:32 by xSrQNSSjcgoX
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 7/350 2026-11-15 03:10 by xSrQNSSjcgoX
[文学芳草园] 厉娜 +4 张丹枫1991 2026-11-09 6/300 2026-11-15 00:48 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 9/450 2026-11-13 11:02 by Equinoxhua
[考博] 27博士申请 +5 白白白ly 2026-11-09 5/250 2026-11-13 05:01 by wlf1982
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:51 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:51 by ECLTXnJnRSXf
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 cdqGD6ftHmbl 2026-11-11 5/250 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 czAiolzR0IJC 2026-11-10 9/450 2026-11-12 11:11 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:14 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 8/400 2026-11-12 09:46 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:03 by 9fOTqj074tIg
信息提示
请填处理意见