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树在开花

铁虫 (小有名气)

[求助] 分析一种生物碱(新药),在用Aglient Eclipse C18分析时,峰拖尾严重。 已有7人参与

分析一种生物碱(新药),在用Aglient Eclipse C18(刚买的新柱子)分析时,峰拖尾严重。拖尾因子2.8。理论塔板数只有1600.这是分析有关物质的条件:缓冲液(水-0.1%磷酸-0.02%三乙胺)—乙腈(79:21),流动相使用前经0.45μm 有机膜抽滤,并超声脱气。后了解到生物碱类容易拖尾,那么应该怎么解决呢?
三乙胺的量不是不能加太多吗?伤害柱子严重。
另外看到有的生物碱分析方法有添加磷酸二氢钾缓冲溶液的。不知道能不能添加。一般分析生物碱的流动相的pH是多少呀?

如果我改变流动相后,会不会对有些有关物质检测不出来呢?很担心的一点。
我不是学分析,因为分析方法在自己的液相上出了问题,药在10月1号前解决。该怎么调整呢?谢谢大家。
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jinyixiao

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

将流动相改为10mm庚烷磺酸钠-乙腈,应该能解决问题。
       注意:1 10mm庚烷磺酸钠不调pH值,保留时间和峰形理想则不用2
                2 10mm庚烷磺酸钠用磷酸调pH值至3  此条件会较损害柱子
13楼2015-09-30 17:41:10
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yan1984

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1先把缓冲液中的磷酸去掉,三乙胺弄成0.1%试试,生物碱一般流动相pH要求中性以上。注意:一般C18的pH不大于8。
2如果还不行,把乙腈换成甲醇再试试。
3磷酸二氢钾很常用,没什么问题。
4改变流动相以后有可能会导致有些有关物质检测不出来,所以需要你进行方法验证。
2楼2015-09-26 20:41:24
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个是碱性化合物的话,要是在酸性条件下峰形不好的话,你就换用extend C18嘛 可以在碱性条件下使用的
3楼2015-09-26 23:11:52
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知識無價

铁杆木虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
生物碱的峰形有时候就是很难看的。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-27 15:13:55
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