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xiamuxi

新虫 (小有名气)

[交流] 克隆相关 已有8人参与

我现在在做分子克隆的实验,骨架和片段都是用ASCI酶切的,大小分别是:6219bp、6422bp,T4连接酶连,16度5、6个小时或者过夜,骨架和片段体积比是1:7,长斑的情况不定,有时多有时少,做菌液电泳有时候有滞后的但酶切检测不对,做了三个多月了,,担心我的毕业望大家给些高见啊
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生活需要信仰。
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jackyoung

新虫 (正式写手)

★ ★
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-28 22:55:31
建议比例换成1:3或1:2,载体务必去磷酸化,鉴定时酶切应该不好判定结果,可以选择片段上的单酶切位点切,也可以用Asc 1加载体或片段上的组合酶切。如此,祝好。

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CestLaVie
8楼2015-09-28 20:00:42
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wuyuanqing

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
单酶切?试试载体去磷酸化

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2楼2015-09-25 23:23:27
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iszku

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
是不是酶切过了?

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3楼2015-09-26 03:10:58
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海里的淡水鱼

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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4楼2015-09-26 09:28:30
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