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我现在在做分子克隆的实验，骨架和片段都是用ASCI酶切的，大小分别是：6219bp、6422bp，T4连接酶连，16度5、6个小时或者过夜，骨架和片段体积比是1:7，长斑的情况不定，有时多有时少，做菌液电泳有时候有滞后的但酶切检测不对，做了三个多月了， ，担心我的毕业 望大家给些高见啊 |
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
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链接之前一定要纯化，即切胶回收或者过柱子，纯水洗脱。磷酸化去磷酸化不见得非的做，个人经验，如果进行回收不需要做。大片段先连到T载体上会好的多，之后酶切t载体，回收目的片段再继续，很多情况下是酶切切的不好… 发自小木虫Android客户端 |
16楼2015-10-05 00:19:36
wuyuanqing
金虫 (正式写手)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 4703.7
- 散金: 50
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- 帖子: 458
- 在线: 243.7小时
- 虫号: 1210774
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- 专业: 微生物遗传育种学
2楼2015-09-25 23:23:27
3楼2015-09-26 03:10:58
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4楼2015-09-26 09:28:30