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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 最近TA克隆老是失败，请大家分析一下。
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王平阳

金虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by andywang6137 at 2015-10-11 22:27:19
你好，这是我重新做实验的结果，重新PCR扩增，胶回收，TA克隆，LB培养基（全部新买的试剂），Amp（用的还是之前买的生工的，新买的氨苄粉末由于超纯水仪器坏了，怕水质太差，没有配）。摇菌复苏1小时，涂板菌液取了 ...

刚刚我们实验室师弟师妹也出现了这种情况，涂得平板一团糊，我检查了一下，原因相当简单，复苏用的培养基污染了，长满了菌还在用，所以出现这种情况的原因很多的，建议你还是先用新的AMP试试，你所说的感受态死细胞，个人觉得可能性不大，既然是死细胞就不会生长，不会生长怎么会糊成一片呢？
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没有做不到，只有想不到！
21楼2015-10-12 09:31:45
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sanjingmeng

金虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by andywang6137 at 2015-10-11 22:27:19
你好，这是我重新做实验的结果，重新PCR扩增，胶回收，TA克隆，LB培养基（全部新买的试剂），Amp（用的还是之前买的生工的，新买的氨苄粉末由于超纯水仪器坏了，怕水质太差，没有配）。摇菌复苏1小时，涂板菌液取了 ...

看这个情况，应该是抗生素失效的可能性打，配制平板的时候一定要等培养基不烫手了40-45℃左右再加氨苄
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我是钉子我怕锤子
22楼2018-08-13 09:16:22
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暴走的小鱼干

新虫 (小有名气)
我之前涂板也是这样，就是amp失效了

发自小木虫IOS客户端
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23楼2018-08-13 13:56:36
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