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western blot 检测磷酸化蛋白之后是否需要strip去除抗体再检测总蛋白? 已有4人参与
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| 许多文献会给出磷酸化蛋白的条带以及相应的总蛋白(磷酸化和未磷酸化蛋白)的条带,那么在检测完磷酸化蛋白之后是否一定要strip去除原来的一抗二抗之后才能检测相应的总蛋白?如果没有strip,那么检测到的总蛋白结果是否可靠?如果strip了,那么是否需要验证原来的一抗和二抗已经去除干净(即再次封闭后孵育二抗,然后再检测),而不只是加显影液检测二抗?另外,有些抗体没有标明可以同时检测磷酸化和未磷酸化的蛋白,那么这种抗体是否不合适?有人注意过这个问题吗? |
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