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small_fish

银虫 (小有名气)

[求助] 产物出不来

我所用的模板GAPDH正常,目的条带出不来。
模板是一年以前用过的,能出结果,条带很亮。为了防止降解,这次还是新和成的
用的是诺唯赞的2*Taq mix(就是混好的那种),之前也是用的这种
怀疑过是mix,换了另一个牌子还是不行,引物也重新和成果,不行。模板稀释倍数从10倍-30倍都试过,不行。
我要疯了 难不成水会有问题? 我用的是超纯水 还是引物问题 抓狂
mark有点不太清晰 从上到下为 100 200 300 400 500一直到1000
产物出不来
5.jpg
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药理小鼠坑爹啊
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lchxs465

禁虫 (初入文坛)

★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2015-09-24 22:31:54
本帖内容被屏蔽

3楼2015-09-24 20:59:21
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查看全部 6 个回答

dorecnu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
重新设计引物再试
2楼2015-09-24 20:26:52
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small_fish

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lchxs465 at 2015-09-24 20:59:21
我觉的基本是因为引物不行,或者p的条件不行,你退火温度什么的摸过了吗?可以做个梯度试试

我做了 从50-60度 共八个梯度温度 引物的Tm值是58度左右 还是没结果
药理小鼠坑爹啊
4楼2015-09-24 22:36:09
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lchxs465

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

5楼2015-09-25 16:52:47
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