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关于裂解BL21(DE3)细菌的问题 已有1人参与
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| 最近用BL21(DE3)表达蛋白，不知道如何裂解细菌。想请教一下裂解BL21的裂解液都是通用的吗？还是说会随着导入质粒的不同而不同？我看了一些帖子，说是PBS重悬后超声破壁就可以了，我们用的是加入裂解液后37°摇半小时，然后-20°半小时，37水浴5分钟，后两步重复几次，然后100°煮5分钟，试验了几种裂解液，似乎效果都不太好，上清目标条带很淡，沉淀很浓，是上样的蛋白浓度太高了？还是说我们的蛋白都成了包涵体在沉淀中？谢谢 |
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