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关于裂解BL21(DE3)细菌的问题 已有1人参与
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| 最近用BL21(DE3)表达蛋白,不知道如何裂解细菌。想请教一下裂解BL21的裂解液都是通用的吗?还是说会随着导入质粒的不同而不同?我看了一些帖子,说是PBS重悬后超声破壁就可以了,我们用的是加入裂解液后37°摇半小时,然后-20°半小时,37水浴5分钟,后两步重复几次,然后100°煮5分钟,试验了几种裂解液,似乎效果都不太好,上清目标条带很淡,沉淀很浓,是上样的蛋白浓度太高了?还是说我们的蛋白都成了包涵体在沉淀中?谢谢 |
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a86052
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