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slina0925

铁虫 (初入文坛)

[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳灌胶技巧 已有12人参与

亲爱的们,帮帮我吧,现在刚开始学习变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,但在刚开始灌胶就出了问题,总是有气泡。不知道是哪里出了问题?求助啊,谢谢。不胜感激!

聚丙烯酰胺凝胶电泳灌胶技巧
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没有什么大不了的。。。
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郭盼盼

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
39楼: Originally posted by biostar2009 at 2015-10-06 18:46:00
好久不见鳄鱼齿,原来这个东西还没有完全绝种。
我只处理过20X40cm,0.4mm,我用20%的,气泡从来不是问题,就怕跑了一半胶凝了

鳄鱼齿长啥样
坚持该坚持的
41楼2015-10-08 08:35:04
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查看全部 45 个回答

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一句话,练习的不够呗,功夫出自有心人

发自小木虫Android客户端
2楼2015-09-22 20:02:29
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小小鸟fq

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2015-09-22 22:17:20
楼主是指做蛋白质免疫印迹吗?我最近在做这个,几乎没有出现过气泡,希望能和你分享我的方法。用枪头灌胶(分离胶)时候沿着板的一端缓慢注入,尽量不要打进去太多气泡,有些小气泡时也不太要紧,胶板垂直放置时一般会自动浮上来,灌胶结束后可以立刻加异丙醇(ddH2O也可以)封闭压线,这样也能逼出气泡,而且分离胶平面也会比较平直。之后就不要碰胶板了,现在室温下大概20~30min分离胶就凝固了,倒掉异丙醇并倒置控干,然后再配置浓缩胶,也是沿一侧缓缓加入,加到溢出为止,将事先准备好的上样梳迅速插入,注意梳子应平直,等待自然凝固,再小心拔出梳子。说了这么多,注意事项有二:1.板架要放在水平桌面上,加样至凝胶过程不要随意挪动;2.灌入分离胶后加入异丙醇压线,基本上不会出现气泡。祝你好运!
3楼2015-09-22 20:25:56
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jjxyygx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
熟能生巧,做多了就会。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-23 00:43:50
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