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羧甲基茯苓多糖的灭菌问题已有3人参与
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| 实验室有羧甲基茯苓多糖，想进一步实验，但是要灭菌，试过用0.22μm和0.45μm的滤头，但是会堵住，高温灭菌又会破坏多糖请教各位有什么好的办法，用紫外灯可行吗？ |
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6楼2015-09-22 21:35:35
maomao851119
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2015-09-22 14:56:58
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xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2015-09-22 14:56:58
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那就要看你灭菌后的产品要做什么用途了 如果对无菌要求根高的话 紫外线灭菌肯定不够的 尤其对液体 灭菌嘛 无非就几种方法 你的产品是液体 既然湿热不行的话 最好的就是过滤了 你说滤头会堵 原因是什么？ 1 产品本身黏度很大？ 2 产品浓度很大？ 3 产品菌体太多？ 4 里面杂质太多？ 如果是1，2 稀释--过滤--管式超滤浓缩 对环境和操作要求挺高 如果是3，4 高速离心--0.8--0.45--0.22 可能对样品损耗比较大 如果实在不行的话 co-60照射吧 估计对样品影响会很大 我们之前有个类似的 做过 不行 |
2楼2015-09-22 10:19:51
3楼2015-09-22 10:48:50
maomao851119
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xiaoxiao270: 金币+5, 3Q 2015-09-22 14:57:06
xiaoxiao270: 金币+5, 3Q 2015-09-22 14:57:06
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我明白了 你现在其实还没确定是直接将多糖固体直接灭菌 还是溶解后变成液体再灭菌是不？ 你之前说 高温灭菌会对他造成破坏 你这个只是做细胞毒理试验 我能不能理解为只要这个样品里面活的微生物就行了？ 那么你这个样品在多高的温度会被破坏 ？ 破坏率是多高？ 被破坏的样品（相当于杂质）对细胞毒理有没影响？ 这些基础数据应该要有的 一般灭菌条件都是121摄氏度 -8--10分钟 你的试验条件可以选择一个远低于这个条件的灭菌方式 比如说100度 1h 等等 如果你担心灭菌不彻底 可以细胞培养的时候加点双抗？ 至于说是直接粉末灭菌 还是溶解后再灭菌 个人觉得是粉末直接灭菌的好 毕竟液体还存在一个热穿透问题 另外 我之前做过一个多糖产品 分子量达到150万 溶解后非常黏 但是他有个特性 在一定盐浓度存在的条件下 他的黏度会立即下降很多 不知道你这个多糖也存在这个情况 不妨试一下 溶解后加入2%左右浓度的氯化钠 看看他的黏度有没下降 如果有的话 过滤肯定会好很多 当然 这必须是在不影响你后面的细胞毒理试验的前提下 紫外照射灭菌 这个词本身就不对 紫外照射根本不能称之为灭菌 充其量只能叫作消毒吧 |
4楼2015-09-22 12:53:58