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苏黎日光

新虫 (初入文坛)

[求助] 鱼类肌肉DNA提取 已有1人参与

提的鱼类肌肉DNA，以前用过这种方法能提出了，但是最近提了好多次一直这样子。哪位大神帮我分析一下原因。

鱼类肌肉DNA提取
IMG_20150921_105404.jpg


鱼类肌肉DNA提取-1
IMG_20150921_105244.jpg
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1楼 2015-09-21 13:05:05
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反应链

新虫 (正式写手)
这电泳图上有明显的基因组DNA泳带啊。

RNA残留明显，建议使用Rnase A消化。也有蛋白质残留，记得多用酚氯仿抽提一次。也有部分降解，取样马上液氮冻存。
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2楼2015-09-21 13:13:56
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苏黎日光

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 反应链 at 2015-09-21 13:13:56
这电泳图上有明显的基因组DNA泳带啊。

RNA残留明显，建议使用Rnase A消化。也有蛋白质残留，记得多用酚氯仿抽提一次。也有部分降解，取样马上液氮冻存。

意思需要用氯仿抽提两次。那胶是不是放过夜效果好一点呢

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3楼2015-09-21 13:17:04
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反应链

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 苏黎日光 at 2015-09-21 13:17:04
意思需要用氯仿抽提两次。那胶是不是放过夜效果好一点呢
...

不是胶的问题，而是杂质和降解影响。

实在不是就用试剂盒吧。
鱼类肌肉DNA提取-2
gDNA extract by kit.png
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4楼2015-09-21 17:19:44
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苏黎日光

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 反应链 at 2015-09-21 17:19:44
不是胶的问题，而是杂质和降解影响。

实在不是就用试剂盒吧。

gDNA extract by kit.png
...

知道了，谢谢

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5楼2015-09-22 07:28:43
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ypan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

有DNA或者RNA 降解，考虑用试剂盒试一试。
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6楼2015-09-28 14:54:24
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苏黎日光

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ypan at 2015-09-28 14:54:24
有DNA或者RNA 降解，考虑用试剂盒试一试。

用试剂盒提了一次效果也不太好

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7楼2015-09-29 09:46:06
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