24小时热门版块排行榜    

查看: 1244  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

linglingerl

金虫 (初入文坛)

[求助] 纯度不太好的未知蛋白测序是做N端测序好还是二级质谱好 已有6人参与

我从蘑菇里面提取蛋白,经过初步分离后,SDS-PAGE显示出比较富集的蛋白条带,但是暂时没办法再进一步纯化,由于时间关系想先测个序,但是不知道N端测序和LS-MS-MS测序那个比较好。
我现在不清楚蛋白的纯度,分子量。想做N端测序吧,又怕那个SDS-PAGE条带只是蛋白异质多聚体中的一个亚基,这样的话测N端只是测了一个部分的亚基,意义不大,还得再做,但是做LS-MS-MS吧,我又不太了解,听说这个可以把SDS-PAGE上相同位置上的不同蛋白的序列测出来,但在网上看见这句话“我今天咨询了一下,因为是未知蛋白,工程师的意思好像N端测序是测定,质谱一般用来做鉴定,所以N端测序优先,如果实在测不出来再用质谱。”这个让我很纠结,这句话里面的质谱是指一级质谱吗?怎么和我咨询的不一样呢?
求各位虫友指导!我到底是做N端测序好还是二级质谱好?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

穿白大褂约会

禁言 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

7楼2015-09-24 14:59:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

jjf139

金虫 (著名写手)

新药研发&药物分析

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议先做个电泳,看看纯度和大致分子量,再决定去N端测序或者LC-MS/MS鉴定,LC-MS/MS既可以测序,又可以鉴定。Edman降解被广泛用于蛋白质的N-末端测定中,两种情况很难甚至不可能通过Edman降解确定N端,N 端封闭或者修饰,多个N 端。
2楼2015-09-21 15:46:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy531483760

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我最近看的一篇提取的大量蛋白质什么的,先做了二维色谱。然后质谱然后埃德曼法的N端测序得出蛋白质
比较笨的小虫虫
3楼2015-09-21 21:09:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随堂笔迹

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
过个柱子纯化一下也花不了多少时间

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-21 23:45:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +15 爱看书的可乐 2026-08-26 17/850 2026-08-27 05:22 by xxniao123
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 +5 晴天加油 2026-08-26 6/300 2026-08-27 04:49 by littlezl
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 基金不中,共勉 +5 eulota 2026-08-26 5/250 2026-08-26 23:33 by young90
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见