24小时热门版块排行榜    

查看: 1147  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

linglingerl

金虫 (初入文坛)

[求助] 纯度不太好的未知蛋白测序是做N端测序好还是二级质谱好 已有6人参与

我从蘑菇里面提取蛋白,经过初步分离后,SDS-PAGE显示出比较富集的蛋白条带,但是暂时没办法再进一步纯化,由于时间关系想先测个序,但是不知道N端测序和LS-MS-MS测序那个比较好。
我现在不清楚蛋白的纯度,分子量。想做N端测序吧,又怕那个SDS-PAGE条带只是蛋白异质多聚体中的一个亚基,这样的话测N端只是测了一个部分的亚基,意义不大,还得再做,但是做LS-MS-MS吧,我又不太了解,听说这个可以把SDS-PAGE上相同位置上的不同蛋白的序列测出来,但在网上看见这句话“我今天咨询了一下,因为是未知蛋白,工程师的意思好像N端测序是测定,质谱一般用来做鉴定,所以N端测序优先,如果实在测不出来再用质谱。”这个让我很纠结,这句话里面的质谱是指一级质谱吗?怎么和我咨询的不一样呢?
求各位虫友指导!我到底是做N端测序好还是二级质谱好?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

随堂笔迹

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
过个柱子纯化一下也花不了多少时间

发自小木虫Android客户端
4楼2015-09-21 23:45:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

jjf139

金虫 (著名写手)

新药研发&药物分析

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议先做个电泳,看看纯度和大致分子量,再决定去N端测序或者LC-MS/MS鉴定,LC-MS/MS既可以测序,又可以鉴定。Edman降解被广泛用于蛋白质的N-末端测定中,两种情况很难甚至不可能通过Edman降解确定N端,N 端封闭或者修饰,多个N 端。
2楼2015-09-21 15:46:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xy531483760

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我最近看的一篇提取的大量蛋白质什么的,先做了二维色谱。然后质谱然后埃德曼法的N端测序得出蛋白质
比较笨的小虫虫
3楼2015-09-21 21:09:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

SDS-PAGE发上来,不然无从解答。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2015-09-22 03:45:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[有机交流] 有机合成求助 20+3 FENGSHUJEI 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:31 by 88817753
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 求调剂 +6 研研,接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考博] 26申博自荐 +3 whh869393 2026-03-24 3/150 2026-03-24 09:55 by 21018060
[考研] 求材料,环境专业调剂 +3 18567500178 2026-03-18 3/150 2026-03-23 23:50 by 热情沙漠
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 263求调剂 +6 yqdszhdap- 2026-03-22 9/450 2026-03-23 12:57 by yqdszhdap-
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ,070300化学学硕,总分287,双非一本,求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +9 想上学吖吖 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:01 by luoyongfeng
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
信息提示
请填处理意见