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weiyounuli

新虫 (小有名气)

[求助] 转化原理 已有1人参与

大神们,我想问一下为什么连接T载转化大肠杆后菌,而连接表达载体的转化农杆菌呢?这两个菌分别是什么时候用,各自的用途和特点是什么呢?
麻烦各位解答了
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小人物12356

新虫 (初入文坛)

大肠杆菌主要用于基因克隆扩增的吧

发自小木虫IOS客户端
4楼2015-09-18 10:39:45
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ppppppppp

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你说的转化大肠杆菌应该是克隆宿主,就是仅仅用于重组质粒的扩增。农杆菌一般是介导转化植物或者丝状真菌的吧?
大肠如DH5α、mach T1等是很好的克隆宿主,用此菌株制备的感受态效率高,因此重组质粒的成功率高。当然也有如BL21等用于表达的,但是由于其转化效率不高,一般要先经过转化前面的菌株后提取质粒再转化表达宿主的。
另外,农杆菌转化效率更低,如果直接把连接产物转化的话,估计几十年都不能成功。一般是用构建好的质粒转化的,而构建的质粒一般是依靠大肠来完成的。

有点乱,希望对你有帮助。
初来乍到,请多指教
2楼2015-09-17 21:00:59
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weiyounuli

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ppppppppp at 2015-09-17 21:00:59
你说的转化大肠杆菌应该是克隆宿主,就是仅仅用于重组质粒的扩增。农杆菌一般是介导转化植物或者丝状真菌的吧?
大肠如DH5α、mach T1等是很好的克隆宿主,用此菌株制备的感受态效率高,因此重组质粒的成功率高。当 ...

差不多明白了,谢谢啦啦
3楼2015-09-18 10:32:20
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