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weiyounuli

新虫 (小有名气)

[求助] 转化原理 已有1人参与

大神们，我想问一下为什么连接T载转化大肠杆后菌，而连接表达载体的转化农杆菌呢？这两个菌分别是什么时候用，各自的用途和特点是什么呢？
麻烦各位解答了
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1楼 2015-09-17 19:52:18
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ppppppppp

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你说的转化大肠杆菌应该是克隆宿主，就是仅仅用于重组质粒的扩增。农杆菌一般是介导转化植物或者丝状真菌的吧？
大肠如DH5α、mach T1等是很好的克隆宿主，用此菌株制备的感受态效率高，因此重组质粒的成功率高。当然也有如BL21等用于表达的，但是由于其转化效率不高，一般要先经过转化前面的菌株后提取质粒再转化表达宿主的。
另外，农杆菌转化效率更低，如果直接把连接产物转化的话，估计几十年都不能成功。一般是用构建好的质粒转化的，而构建的质粒一般是依靠大肠来完成的。

有点乱，希望对你有帮助。
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初来乍到，请多指教
2楼2015-09-17 21:00:59
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weiyounuli

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ppppppppp at 2015-09-17 21:00:59
你说的转化大肠杆菌应该是克隆宿主，就是仅仅用于重组质粒的扩增。农杆菌一般是介导转化植物或者丝状真菌的吧？
大肠如DH5α、mach T1等是很好的克隆宿主，用此菌株制备的感受态效率高，因此重组质粒的成功率高。当 ...

差不多明白了，谢谢啦啦
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3楼2015-09-18 10:32:20
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小人物12356

新虫 (初入文坛)
大肠杆菌主要用于基因克隆扩增的吧

发自小木虫IOS客户端
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4楼2015-09-18 10:39:45
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