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踏雪无痕love

金虫 (正式写手)

[求助] 求做Tn5插入突变的大侠们,希望可以互相交流学习下。 已有1人参与

研二了,导师给的课题是反式茴脑降解菌突变体库的构建,筛选克隆相关基因,搞清楚反式茴脑降解的转化原理,再然后就是构建工程菌。大致是这样的,但是刚开始做自己的课题不久,同实验室的做的东西又都不一样,好多不懂的地方,希望能得到大侠们的指点。
      现在已经鉴定出反式茴脑降解菌是属于恶臭假单胞菌属,现在想将Tn5转入我所做的反式茴脑降解菌里面,我采用的电转化的方法,可是在制备反式茴脑降解菌的电转感受态时遇到瓶颈,尝试多次平板上压根不长或只长几个。这对后续的实验影响极大,所以请大侠们指点,你们是怎么做的?
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踏雪无痕love

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 李万一 at 2015-12-25 11:29:42
我也在做恶臭假单胞菌的电转化,转化条件1.2kv,200欧,25uf,点击0.5毫秒,每次都有菌长出来,但是很遗憾筛不出转化子,因此想用三亲本杂交,希望能和你多多交流

可以的 ,随时欢迎
3楼2015-12-26 00:56:36
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李万一

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也在做恶臭假单胞菌的电转化,转化条件1.2kv,200欧,25uf,点击0.5毫秒,每次都有菌长出来,但是很遗憾筛不出转化子,因此想用三亲本杂交,希望能和你多多交流
2楼2015-12-25 11:29:42
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