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踏雪无痕love

金虫 (正式写手)

[求助] 求做Tn5插入突变的大侠们，希望可以互相交流学习下。 已有1人参与

研二了，导师给的课题是反式茴脑降解菌突变体库的构建，筛选克隆相关基因，搞清楚反式茴脑降解的转化原理，再然后就是构建工程菌。大致是这样的，但是刚开始做自己的课题不久，同实验室的做的东西又都不一样，好多不懂的地方，希望能得到大侠们的指点。
      现在已经鉴定出反式茴脑降解菌是属于恶臭假单胞菌属，现在想将Tn5转入我所做的反式茴脑降解菌里面，我采用的电转化的方法，可是在制备反式茴脑降解菌的电转感受态时遇到瓶颈，尝试多次平板上压根不长或只长几个。这对后续的实验影响极大，所以请大侠们指点，你们是怎么做的？
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1楼 2015-09-17 16:21:55
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李万一

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也在做恶臭假单胞菌的电转化，转化条件1.2kv，200欧，25uf，点击0.5毫秒，每次都有菌长出来，但是很遗憾筛不出转化子，因此想用三亲本杂交，希望能和你多多交流
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2楼2015-12-25 11:29:42
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踏雪无痕love

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 李万一 at 2015-12-25 11:29:42
我也在做恶臭假单胞菌的电转化，转化条件1.2kv，200欧，25uf，点击0.5毫秒，每次都有菌长出来，但是很遗憾筛不出转化子，因此想用三亲本杂交，希望能和你多多交流

可以的 ，随时欢迎
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3楼2015-12-26 00:56:36
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