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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 土壤脲酶活性测定
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土啊土土

新虫 (初入文坛)

[求助] 土壤脲酶活性测定 已有1人参与

怎么我做标准曲线的分光光度计读数总是稳定不了，并且结果很离谱

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1楼 2015-09-17 12:09:50
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

心有千千杰

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-11-02 19:43:07
分光光度计读数不稳定，主要考虑是否存在沉淀 杂质等。数据离谱，实验误差可能性最大

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态度决定一切
2楼2015-09-17 14:20:27
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wang0629

金虫 (小有名气)
请问楼主，你遇到的问题解决了么？
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9楼2016-05-17 11:11:46
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yingmeiqi

新虫 (小有名气)
楼主找到原因了么，最近我也在测脲酶，同样发现在1h之内，测定数据，总是不稳定，随时间感觉都在增加，如果找到原因，还请楼主赐教
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3楼2015-11-01 21:14:31
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土啊土土

新虫 (初入文坛)
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3楼: Originally posted by yingmeiqi at 2015-11-01 21:14:31
楼主找到原因了么，最近我也在测脲酶，同样发现在1h之内，测定数据，总是不稳定，随时间感觉都在增加，如果找到原因，还请楼主赐教

排除仪器问题，就是操作中没有摇匀，有个很重要的就是摇匀后一定要等20min后溶液稳定了再测，我后来测的数据就不会摆动了

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4楼2015-11-02 12:22:37
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yingmeiqi

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 土啊土土 at 2015-11-02 12:22:37
排除仪器问题，就是操作中没有摇匀，有个很重要的就是摇匀后一定要等20min后溶液稳定了再测，我后来测的数据就不会摆动了
...

太好了，那我试试，非常感谢楼主
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5楼2015-11-02 16:25:07
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yingmeiqi

新虫 (小有名气)
在测脲酶的时候，柠檬酸盐缓冲液只需要保证pH为6.7吗，对浓度有没有要求？楼主知道不？
原方法：柠檬酸盐缓冲液(pH6.7)：184g柠檬酸和147.5g氢氧化钾溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/L NaOH将pH调至6.7，用水稀释至1000mL。
我觉得这个用量太大了，就私自缩小了倍数，进行配置的，浓度肯定比原来的浓度小很多，不知道是不是可以
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6楼2015-11-13 13:45:57
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lmhjy

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yingmeiqi at 2015-11-13 13:45:57
在测脲酶的时候，柠檬酸盐缓冲液只需要保证pH为6.7吗，对浓度有没有要求？楼主知道不？
原方法：柠檬酸盐缓冲液(pH6.7)：184g柠檬酸和147.5g氢氧化钾溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/L NaOH将pH调至6.7，用水稀释 ...

我也想知道，用量太大了，我以为写错了
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7楼2015-12-11 17:28:01
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土啊土土

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yingmeiqi at 2015-11-13 13:45:57
在测脲酶的时候，柠檬酸盐缓冲液只需要保证pH为6.7吗，对浓度有没有要求？楼主知道不？
原方法：柠檬酸盐缓冲液(pH6.7)：184g柠檬酸和147.5g氢氧化钾溶于蒸馏水。将两溶液合并，用1mol/L NaOH将pH调至6.7，用水稀释 ...

缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。不要随意变动，我是按1000配的

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8楼2015-12-12 16:29:22
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18093420867

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 土啊土土 at 2015-12-12 16:29:22
缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。不要随意变动，我是按1000配的
...

按1000,pH容易调到6.7吗？我按250，加了大量氢氧化钠还是不行

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10楼2017-04-12 10:52:43
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