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徘徊云中

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质的分级提取 已有2人参与

急求大神指点蛋白质分级提取的具体操作步骤。
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徘徊云中

新虫 (小有名气)

硫酸铵的浓度是从高往低的加还是从低往高呢?
2楼2015-09-15 08:59:04
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
分级沉淀是硫酸氨浓度从低往高。分级沉淀就是用不同浓度的硫酸氨先后沉淀。这是粗分离,效果不是特别好,建议你一次沉淀后,过疏水层析柱。祝顺利。
3楼2015-09-15 09:08:05
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徘徊云中

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-15 09:08:05
分级沉淀是硫酸氨浓度从低往高。分级沉淀就是用不同浓度的硫酸氨先后沉淀。这是粗分离,效果不是特别好,建议你一次沉淀后,过疏水层析柱。祝顺利。

比如说,加入低浓度的硫酸铵溶液后,搅拌离心,再往上清液中加入高浓度的吗?

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4楼2015-09-15 14:36:58
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 徘徊云中 at 2015-09-15 14:36:58
比如说,加入低浓度的硫酸铵溶液后,搅拌离心,再往上清液中加入高浓度的吗?
...

对的,直接加固体好了,比如先加1克,离心后,上清在加2克。祝顺利,液体也行 ,你处理的溶液量就非常大。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2015-09-15 14:49:59
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徘徊云中

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-15 14:49:59
对的,直接加固体好了,比如先加1克,离心后,上清在加2克。祝顺利,液体也行 ,你处理的溶液量就非常大。...

嗯嗯,谢谢

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6楼2015-09-15 16:53:29
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帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
硫酸铵沉淀最普遍的方法是从低浓度往高浓度分级沉淀,我也见过从高浓度往低浓度做的,先将蛋白全部沉淀,然后通过透析来分级提纯。
另外,理论上是不建议直接加硫酸铵固体的,因为会造成局部浓度过大等问题,但是如果你的实验精度要求不那么高的话,就加固体吧,方便节省时间。
7楼2015-09-16 13:32:37
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帖航

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 帖航 at 2015-09-16 13:32:37
硫酸铵沉淀最普遍的方法是从低浓度往高浓度分级沉淀,我也见过从高浓度往低浓度做的,先将蛋白全部沉淀,然后通过透析来分级提纯。
另外,理论上是不建议直接加硫酸铵固体的,因为会造成局部浓度过大等问题,但是如 ...

http://wenku.baidu.com/view/587624204b35eefdc8d333a9.html
这有一片关于盐析的说明,如果需要你可以看看。
你的标题是分级提取蛋白,分级提取蛋白的方法有很多,如果想了解,可以问我。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2015-09-16 13:36:37
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徘徊云中

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 帖航 at 2015-09-16 13:36:37
http://wenku.baidu.com/view/587624204b35eefdc8d333a9.html
这有一片关于盐析的说明,如果需要你可以看看。
你的标题是分级提取蛋白,分级提取蛋白的方法有很多,如果想了解,可以问我。...

好的  谢谢

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9楼2015-09-17 21:30:20
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