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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xiaricha

银虫 (小有名气)

[交流] 测序问题

大家好:
     我挑过两个白斑后,摇了两管菌液,酶切检测正确后,分别送到了两家公司测序。结果出来了,两家公司测的片段大小都是正确的,我在网上比对也都是正确的,但我把这两个片段比对后却发现有十几个碱基不一样,是从头到尾,间隔出现了十几个碱基,翻译的蛋白序列也不一样,但峰值图都比较好,请问这是怎么回事啊?我这两个重组菌还能用吗?谢谢回答!这个片段有可能是新基因,所以我不能判断哪个正确。

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-12 at 09:22 ]
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yelitao1983

银虫 (小有名气)

两家公司测序的序列一致吗!如果一致的话就不是测序的问题!最大的可能就是你的目的基因用PCR扩的时候TAq酶保真性差造成的碱基错配!你的重组菌估计不能用了!得重新做克隆
3楼2008-08-28 22:55:24
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yelitao1983

银虫 (小有名气)

★ ★
xyklmu(金币+2,VIP+0):感谢答复
两家公司测序的序列一致吗!如果一致的话就不是测序的问题!最大的可能就是你的目的基因用PCR扩的时候TAq酶保真性差造成的碱基错配!你的重组菌估计不能用了!得重新做克隆
2楼2008-08-28 22:50:37
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xiaricha

银虫 (小有名气)

测序不一致啊,重组菌不能用了??好伤心啊!我都测了好长时间了,好不容易出了点结果。一家是英俊一家是博恩!
5楼2008-08-29 11:45:17
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

有可能是酶不保真 也可能是你当初挑克隆时就有差异 你可以多挑几个再送 不做蛋白表达就是差几个也不要紧
6楼2008-08-29 12:52:06
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