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love犬夜叉

木虫 (小有名气)

[求助] 转化后小量可以摇起来,转接大量摇不起来 已有1人参与

做质粒的转化,到XL1-blue菌,涂板后12小时很小,所以培养到第二天下午,满板子小菌落,牙签挑单菌落在氨苄和四环素(涂布的板子也是这两种抗生素)的培养基(1.5mlEP)管中培养,几个小时后无明显浑浊,所以又过夜,第二天取菌液做PT-PCR,呈阳性,第三天(菌液放-20保存)取200微升、400微升接种到20ML 双抗LB培养基(开始加的200微升,几个小时后没长,就又接了几管400微升的一起过夜培养),第四天早上看的时候,有的很清亮,有的略微浑浊,只有一个比较浑浊,又都做了一次RT-PCR,结果ct值都一样,拿长得最浑浊的那个转接到20ml双抗培养基又不长了,提质粒也没有条带,不知道是没有还是太微弱检测不出来。求大神指点
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justloveinuyasha
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晞朔

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种情况还没遇到过,再检查你的抗生素类型和浓度
2楼2015-09-14 15:39:06
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