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张小姐123木虫 (小有名气)
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[求助]
关于做蛋白标曲中的浓度计算问题。 已有2人参与
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| 用BSA做的蛋白标曲R2有两个九。将已知浓度为0.5mg/mll的β酪蛋白溶液在酶标板上测定吸光值，代入标曲计算得到的β酪蛋白浓度为0.25mg/ml。这个大概两倍的浓度差异到底是如何造成的，请大神指教啊。 |
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9楼2015-09-16 16:28:10
evangelina
无虫 (小有名气)
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
张小姐123: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-09-11 20:13:32
感谢参与，应助指数 +1
张小姐123: 金币+50, ★★★很有帮助 2015-09-11 20:13:32
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首先要确定目标蛋白的浓度在标曲的线性区间里面，否则就应该先适当稀释再测通光量 如果上面做对的话，有没有可能是蛋白已经降解了呢 也有可能是那个蛋白跟BSA在氨基酸构成上相差很远，所以从BSA来的标曲就不够准确 可以考虑用其他方法 例如 lowry 或者 280 |
2楼2015-09-11 19:34:49
张小姐123
木虫 (小有名气)
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3楼2015-09-11 20:13:23
4楼2015-09-11 23:47:39