应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 重组之后单酶切鉴定偏小
51/1返回列表
查看: 1970  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

土豆没了

新虫 (初入文坛)

[交流] 重组之后单酶切鉴定偏小 已有5人参与

 http://\"重组之后单酶切鉴定偏小\"
如图所示：1、2为原始质粒以及其单酶切、3、4为克隆之后的质粒以及单酶切。从途中看应该是没有连上。但是在克隆板上：载体双酶切连接过夜转化后没有长出克隆子，载体加目的基因连接的板上大概出现75个克隆子这样。
载体大小：10kb ，目的基因700bp，使用BamHⅠ和HpaⅠ进行双酶切。连接摩尔比为载体：目的基因=1：3，目的基因为pcr产物，在BamHⅠ酶切位点前有两个碱基，在HpaⅠ酶切位点后有100bp片段。
连接了好几次都得到同样的结果，请问这是怎么回事啊，做了两个月了，烦，求大神指点迷津
回复此楼

» 猜你喜欢
生活因拼搏而精彩，生命因奋斗而高贵
1楼 2015-09-11 11:00:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

土豆没了

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by viki_MDK at 2015-09-15 10:57:14
为什么判断没有成功？

酶切下来的片段与连接上去的片段大小是一致的，连接后单酶切片段偏小了，比较怪，后来用pcr引物进行克隆也没见出现目的条带，所以很确定是不是我们的连接产物
赞一下 回复此楼
生活因拼搏而精彩，生命因奋斗而高贵
10楼2015-09-17 10:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

土豆没了

新虫 (初入文坛)

重组之后单酶切鉴定偏小-1
AD0A0937-6638-4CA3-B7CA-D419E55A734A.jpg
赞一下 回复此楼
生活因拼搏而精彩，生命因奋斗而高贵
2楼2015-09-11 11:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

土豆没了

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 怜儿新 at 2015-09-14 21:33:30
没有maker吗？

没有，实验室刚刚用没了，所以……
赞一下 回复此楼
生活因拼搏而精彩，生命因奋斗而高贵
4楼2015-09-15 09:50:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

viki_MDK

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为什么判断没有成功？
赞一下 回复此楼
5楼2015-09-15 10:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-30 07:05 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 06:35 by ZPa0EcMwuECS
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 10/500 2026-08-30 06:11 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 05:48 by ZPa0EcMwuECS
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 13/650 2026-08-30 05:38 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 7/350 2026-08-30 01:36 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:25 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +7 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 8/400 2026-08-30 01:14 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 01:12 by ZPa0EcMwuECS
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 00:52 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 00:41 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 面上意见出来了 +8 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 16/800 2026-08-29 20:45 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭