应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 重组之后单酶切鉴定偏小
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1759  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

土豆没了

新虫 (初入文坛)

[交流] 重组之后单酶切鉴定偏小 已有5人参与

 http://\"重组之后单酶切鉴定偏小\"
如图所示：1、2为原始质粒以及其单酶切、3、4为克隆之后的质粒以及单酶切。从途中看应该是没有连上。但是在克隆板上：载体双酶切连接过夜转化后没有长出克隆子，载体加目的基因连接的板上大概出现75个克隆子这样。
载体大小：10kb ，目的基因700bp，使用BamHⅠ和HpaⅠ进行双酶切。连接摩尔比为载体：目的基因=1：3，目的基因为pcr产物，在BamHⅠ酶切位点前有两个碱基，在HpaⅠ酶切位点后有100bp片段。
连接了好几次都得到同样的结果，请问这是怎么回事啊，做了两个月了，烦，求大神指点迷津
回复此楼

» 猜你喜欢
生活因拼搏而精彩，生命因奋斗而高贵
1楼 2015-09-11 11:00:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

土豆没了

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by viki_MDK at 2015-09-15 10:57:14
为什么判断没有成功？

酶切下来的片段与连接上去的片段大小是一致的，连接后单酶切片段偏小了，比较怪，后来用pcr引物进行克隆也没见出现目的条带，所以很确定是不是我们的连接产物
赞一下 回复此楼
生活因拼搏而精彩，生命因奋斗而高贵
10楼2015-09-17 10:50:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

土豆没了

新虫 (初入文坛)

重组之后单酶切鉴定偏小-1
AD0A0937-6638-4CA3-B7CA-D419E55A734A.jpg
赞一下 回复此楼
生活因拼搏而精彩，生命因奋斗而高贵
2楼2015-09-11 11:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

土豆没了

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 怜儿新 at 2015-09-14 21:33:30
没有maker吗？

没有，实验室刚刚用没了，所以……
赞一下 回复此楼
生活因拼搏而精彩，生命因奋斗而高贵
4楼2015-09-15 09:50:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

viki_MDK

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
为什么判断没有成功？
赞一下 回复此楼
5楼2015-09-15 10:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 287求调剂 +7 land xuxu 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:44 by wxiongid
[考研] 考研调剂 +8 呼呼？~+123456 2026-03-24 8/400 2026-03-26 23:04 by 不吃魚的貓
[考研] 312求调剂 +8 上岸吧ZJY 2026-03-22 12/600 2026-03-26 18:49 by muchong357
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 材料求调剂 +4 .m.. 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:30 by peike
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 307求调剂 +5 超级伊昂大王 2026-03-24 5/250 2026-03-24 15:46 by 星空星月
[考研] 341求调剂(一志愿湖南大学070300) +5 番茄头--- 2026-03-22 6/300 2026-03-23 23:45 by Txy@872106
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 306求调剂 +5 来好运来来来 2026-03-22 5/250 2026-03-22 16:17 by BruceLiu320
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭