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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » quickchange II定点突变不长菌落
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] quickchange II定点突变不长菌落

用安捷伦的Quickchange II定点突变，引物用官网设计的，34bp，Tm73°, PCR根据说明书来的，模板分别加了50,100,150,200ng, DpnI 消解3小时，转化后平板上没有菌落。抗生素是对的，载体3000+片段2000。请问有遇到类似问题的前辈吗？一个试剂盒只能做10次，做了两次都没长菌落。
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1楼 2015-09-10 02:12:56
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silulu23

新虫 (小有名气)
你也在做突变吗？最近也要做，打算用安捷伦的，可是没有合适的试剂盒~我的质粒有14kb，你的为题解决了吗？求交流
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Everyday is a new day!
2楼2015-11-06 16:06:59
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by silulu23 at 2015-11-06 16:06:59
你也在做突变吗？最近也要做，打算用安捷伦的，可是没有合适的试剂盒~我的质粒有14kb，你的为题解决了吗？求交流

agilent的quickchange XL是做长片段的，我做过15K的
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3楼2015-11-07 02:32:02
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大卫·李

铁虫 (初入文坛)
啊啊啊。。。我也是这样，做了几次，板上什么都没有，你现在做出来了吗？能否指导一下？
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4楼2015-12-07 10:40:56
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