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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

[求助] quickchange II定点突变不长菌落

用安捷伦的Quickchange II定点突变,引物用官网设计的,34bp,Tm73°, PCR根据说明书来的,模板分别加了50,100,150,200ng, DpnI 消解3小时,转化后平板上没有菌落。抗生素是对的,载体3000+片段2000。请问有遇到类似问题的前辈吗?一个试剂盒只能做10次,做了两次都没长菌落。
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by silulu23 at 2015-11-06 16:06:59
你也在做突变吗?最近也要做,打算用安捷伦的,可是没有合适的试剂盒~我的质粒有14kb,你的为题解决了吗?求交流

agilent的quickchange XL是做长片段的,我做过15K的
3楼2015-11-07 02:32:02
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silulu23

新虫 (小有名气)

你也在做突变吗?最近也要做,打算用安捷伦的,可是没有合适的试剂盒~我的质粒有14kb,你的为题解决了吗?求交流
Everyday is a new day!
2楼2015-11-06 16:06:59
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大卫·李

铁虫 (初入文坛)

啊啊啊。。。我也是这样,做了几次,板上什么都没有,你现在做出来了吗?能否指导一下?
4楼2015-12-07 10:40:56
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