24小时热门版块排行榜    

查看: 1357  |  回复: 11

evil丶zero

金虫 (小有名气)

[求助] 请问挑出来的重组子做快转接种,同一个平板的菌落会不会既有我需要的重组子也有空载 已有2人参与

求助

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

hc-material

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
evil丶zero: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-09-09 16:03:01
不会的吧。空载在抗性赛选培养基上不长的啊。祝顺利。
2楼2015-09-09 09:44:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

evil丶zero

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by hc-material at 2015-09-09 09:44:33
不会的吧。空载在抗性赛选培养基上不长的啊。祝顺利。

我这个是有抗性的空载,目的片段1000多bp。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2015-09-09 10:07:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuabachon

金虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
evil丶zero: 金币+2, ★★★很有帮助 2015-09-09 16:03:12
筛选的抗性与空载一样?那不好筛啊。即使不一样空载的菌会在阳性菌周边长出小的菌落,成卫星菌落也是正常的。
4楼2015-09-09 10:55:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

evil丶zero

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zhuabachon at 2015-09-09 10:55:46
筛选的抗性与空载一样?那不好筛啊。即使不一样空载的菌会在阳性菌周边长出小的菌落,成卫星菌落也是正常的。

可以筛出来,筛选就是概率问题。问题是我挑出来的重组子做转化,因为时间不超过12小时平板上的菌落很小,怕接不上所以我每瓶接种接了两三个菌落。后来想菌落不是单一的会不会一个平板上的菌落有两种类型呢?
5楼2015-09-09 16:08:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuabachon

金虫 (小有名气)


引用回帖:
5楼: Originally posted by evil丶zero at 2015-09-09 16:08:14
可以筛出来,筛选就是概率问题。问题是我挑出来的重组子做转化,因为时间不超过12小时平板上的菌落很小,怕接不上所以我每瓶接种接了两三个菌落。后来想菌落不是单一的会不会一个平板上的菌落有两种类型呢?...

一般来说都是单一的,你是摇菌液后做PCR鉴定吗,鉴定为阳性以后,还得多划几次平板纯化下才能用。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2015-09-09 20:54:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

evil丶zero

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhuabachon at 2015-09-09 20:54:27
一般来说都是单一的,你是摇菌液后做PCR鉴定吗,鉴定为阳性以后,还得多划几次平板纯化下才能用。...

做的是酶切验证,条带清晰。对了你说的还要划线在接一次是标准流程么?我没有做啊,直接拿去测序了…老板我会不会骂我?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
7楼2015-09-10 00:26:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuabachon

金虫 (小有名气)


引用回帖:
7楼: Originally posted by evil丶zero at 2015-09-10 00:26:16
做的是酶切验证,条带清晰。对了你说的还要划线在接一次是标准流程么?我没有做啊,直接拿去测序了…老板我会不会骂我?
...

就怕不纯测出来杂峰啊,纯化后你以后保存及提取质粒才不会误事。看测的结果吧。结果出来通知我下哦。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

8楼2015-09-10 12:38:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

evil丶zero

金虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by zhuabachon at 2015-09-10 12:38:43
就怕不纯测出来杂峰啊,纯化后你以后保存及提取质粒才不会误事。看测的结果吧。结果出来通知我下哦。...

两个样品测序,一个结果很完美,接头序列没有问题;另一个测序公司说,鉴定无条带,还请重新提取质粒测序。
9楼2015-09-21 13:41:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuabachon

金虫 (小有名气)


引用回帖:
9楼: Originally posted by evil丶zero at 2015-09-21 13:41:10
两个样品测序,一个结果很完美,接头序列没有问题;另一个测序公司说,鉴定无条带,还请重新提取质粒测序。...

两个是重复吗,无条带应该就是空载质粒了
10楼2015-09-22 11:16:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 evil丶zero 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学求调剂 +4 奶油草莓. 2026-03-22 5/250 2026-03-23 19:37 by pswait
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +6 墨墨漠 2026-03-23 7/350 2026-03-23 16:09 by 墨墨漠
[考研] 081700 调剂 267分 +5 迷人的哈哈 2026-03-23 5/250 2026-03-23 14:59 by lbsjt
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +8 材料学257求调剂 2026-03-23 9/450 2026-03-23 13:01 by ztnimte
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 333求调剂 +6 87639 2026-03-21 10/500 2026-03-23 10:41 by Iveryant
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 3/150 2026-03-23 10:32 by Iveryant
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
信息提示
请填处理意见