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zc980735353

铁虫 (初入文坛)

[求助] 抗菌实验96孔板测MIC问题 已有1人参与

大家好,最近我做了4种菌(MRSA 大肠 金葡 沙门),96孔板培养了18小时左右,测OD时所有的孔数据都是一样的,都没有长菌(包括空白菌液对照),(菌液稀释了10的5次方,LB培养基,)不知道是哪里出了问题?还望指导,(最好有详细的步骤)谢谢
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smilingworld

新虫 (小有名气)

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楼主说的在96孔板培养了18个小时是什么?只是让10的5次方的菌单纯的培养在96孔板里,没有加抗生素稀释液么?
2楼2015-09-09 09:51:23
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smilingworld

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by zc980735353 at 2015-09-09 15:57:14
将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿色假单胞菌、枯草芽孢杆菌在灭菌LB培养基平板上过夜培养,挑取单菌落接种于灭菌锥形瓶的LB培养液,37℃170 r/min过夜培养。将培养后的菌液作1:1000稀释(使菌数达到105~106cfu/ml  ...

楼主所检测的最高抗菌拟肽的浓度是102.4μg/ml,然后依次2倍稀释对吧?你在培养18个小时之前有没有测OD?还有18个小时可能时间有点短,我做的MIC时,在37度环境培养了3天左右,才有孔变浑浊。还有一点37度保存的时候,一定要密封好96孔板,不然里面的水分会蒸发,多少影响最后结果
4楼2015-09-09 17:27:30
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smilingworld

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by zc980735353 at 2015-09-10 09:11:39
还有我做的时候是加的稀释好的菌液和药液,需要加培养基吗?我怀疑是不是没加培养基所以没长?...

楼主说加新鲜培养基?跟加培养基没有关系,加了培养基药液菌液浓度反而降低,结果不准确
6楼2015-09-10 09:28:00
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