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黄崇

新虫 (初入文坛)

[求助] Elisa抗原异常情况探讨

请教下大家,是否遇到过这种问题,用抗原(重组蛋白)做标曲,试剂盒为双抗夹心法,在抗体对无误的前提下,抗原做梯度,从5ug-62pg,在25ng前,信号都为最大值,而在下一个稀释梯度(10ng),信号变为阴性,同时原装的标曲,阴阳质控无误,但,单纯加入PBS作为抗原,反应,OD能达到0.5.——大家觉得造成这样的可能有哪些?

我的猜想:1.抗原的序列是错的
                  2.结合PBS,有0.5信号,抗原体系也为PBS,是否更换体系,能有所改变
期待大家的猜想和推断。


实验数据简图                                                                
                20150902      20150908
1        5ug                ( + )                ( + )
2        1ug                ( + )         ( + )
3        100ng        ( + )                ( + )
4        10ng        0.181        1.82
5        1ng                0.168     0.155
6        500pg        0.089        0.105
7        250pg        0.088        0.088
8        125pg        0.088        0.083
9        62.5pg        0.09               0.076
10        标准品A        0.083        0.072
11        标准品B        0.13              0.101
12        标准品C        0.195        0.154
13        标准品D        0.317        0.249
14        标准品E        0.726        0.63
15        标准品F        1.148        0.751
16        标准品G        1.469        1.194
17        阳性质控        1.004        0.752
18        阴性质控        0.171        0.133
19        蒸馏水        0.271        0.203
20        蒸馏水        0.283        0.23
21        PBS              0.152               0.495
22        PBS              0.147               0.47
23        空白              0.155               0.131
24        空白               0.147       0.128
其中1-9为自制抗原,稀释,数字浓度单位为XX/ml
1000ng        ( + )
100ng        ( + )
75ng        ( + )
50ng        ( + )
25ng        ( + )
0               0.06
阳性对照        0.476
阴性对照        0.102
此数据同为抗原梯度稀释。
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feiyue122

金虫 (正式写手)

两次试验所用的PBS是用同一批吗?如果是的话,有可能是第二次PBS溶液收到污染了,建议更换PBS溶液。
2楼2015-12-14 11:27:27
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xxxxqqqq

新虫 (小有名气)

我也遇到这种情况,怎么解决的?

发自小木虫Android客户端
3楼2019-03-02 20:36:43
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