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Elisa抗原异常情况探讨
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请教下大家，是否遇到过这种问题，用抗原（重组蛋白）做标曲，试剂盒为双抗夹心法，在抗体对无误的前提下，抗原做梯度，从5ug-62pg，在25ng前，信号都为最大值，而在下一个稀释梯度（10ng)，信号变为阴性，同时原装的标曲，阴阳质控无误，但，单纯加入PBS作为抗原，反应，OD能达到0.5.——大家觉得造成这样的可能有哪些？ 我的猜想：1.抗原的序列是错的 2.结合PBS，有0.5信号，抗原体系也为PBS，是否更换体系，能有所改变 期待大家的猜想和推断。 实验数据简图 20150902 20150908 1 5ug ( + ) ( + ) 2 1ug ( + ) ( + ) 3 100ng ( + ) ( + ) 4 10ng 0.181 1.82 5 1ng 0.168 0.155 6 500pg 0.089 0.105 7 250pg 0.088 0.088 8 125pg 0.088 0.083 9 62.5pg 0.09 0.076 10 标准品A 0.083 0.072 11 标准品B 0.13 0.101 12 标准品C 0.195 0.154 13 标准品D 0.317 0.249 14 标准品E 0.726 0.63 15 标准品F 1.148 0.751 16 标准品G 1.469 1.194 17 阳性质控 1.004 0.752 18 阴性质控 0.171 0.133 19 蒸馏水 0.271 0.203 20 蒸馏水 0.283 0.23 21 PBS 0.152 0.495 22 PBS 0.147 0.47 23 空白 0.155 0.131 24 空白 0.147 0.128 其中1-9为自制抗原，稀释，数字浓度单位为XX/ml 1000ng ( + ) 100ng ( + ) 75ng ( + ) 50ng ( + ) 25ng ( + ) 0 0.06 阳性对照 0.476 阴性对照 0.102 此数据同为抗原梯度稀释。 |
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